In vitro model of the blood-brain barrier established by co-culture of primary sheep cerebral microvascular endothelial and astrocyte cells. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 24 (3): 379-386, 2018379-386, . DOI: 10.9775/kvfd.2017 Abstract Blood-brain barrier (BBB) characteristics are induced and maintained by cross-talk between brain microvessel endothelial cells and neighbouring elements of the neurovascular unit. It plays a primary role in a selective diffusion barrier at the level of the cerebral microvascular endothelium. Here, we have developed and characterized an in vitro model of the blood-brain barrier by seeding primary brain microvascular endothelial cells (BMECs) and astrocyte cells (ACs) from sheep on a polyester Transwell cell culture membrane with 0.4-μm pores, and conducted transepithelial electrical resistance measurements (TEER), leakage tests and assays for the permeability of horseradish peroxidase (HRP). The results of TEER and 4-h leakage assay showed that the new syngeneic BBB model had a characteristic of BBB in vivo. The HRP permeability test showed that the BBB model had good barrier function. Results showed that our model may be a valuable tool in the study of the mechanisms of brain invasion mediated by internalins of Listeria monocytogenes. Keywords: Blood-brain barrier, Astrocytes, Brain microvascular endothelial cells, Co-culture, In vitro BBB model, Sheep Primer Koyun Serebral Mikrodamar Endotelyal ve Astrosit Hücrelerinin Birlikte Kültüre Edilmesiyle Oluşturulmuş In vitro Kan Beyin Bariyeri Modeli ÖzKan beyin bariyeri beyin mikrodamar endotelyal hücreleri ve nörovasküler birimin komşu elementleri tarafından oluşturulur ve devamlılığı sağlanır. Kan beyin bariyeri serebral mikrovasküler endotel seviyesinde seçici difüzyon bariyeri olarak önemli bir rol oynar. Bu çalışmada 0.4-μm gözeneğe sahip polyester Transwell hücre kültürü membranına koyun primer beyin microdamar endotel hücreleri ve astrosit hücrelerinin ekimiyle in vitro kan beyin bariyeri oluşturuldu. Karakterizasyonu transepitelyal elektrik direnç ölçümleri, sızıntı testleri ve horseradish peroksidaz geçirgenliği testleri ile gerçekleştirildi. Transepitelyal elektrik direnç ölçümleri ve 4-h sızıntı testleri sonuçları yeni oluşturulan singeneik kan beyin bariyeri modelinin in vivo kan beyin bariyeri özelliklerine sahip olduğunu gösterdi. Horseradish peroksidaz geçirgenliği testi yeni oluşturulan kan beyin bariyerinin iyi bariyer fonksiyonlarına sahip olduğunu gösterdi. Elde edilen sonuçlar oluşturulan Listeria monocytogenes internalinleri tarafından oluşturulan beyin invazyonunun mekanizmasının çalışılmasında bu modelin yararlı olabileceğini göstermektedir.