BackgroundResistance to multiple classes of insecticides has been detected in the malaria vector Anopheles albimanus in northwest Peru. Acetylcholinesterase (AChE) insensitivity has previously been associated with resistance to organophosphate (OP) and carbamate (CA) insecticides in arthropods. A single point mutation on the ace-1 gene (G119S) associated with resistance to OPs and CAs has been described previously in four anopheline species, but not in field-collected An. albimanus. The present study aimed to characterize the role of ace-1 in conferring resistance to both OPs and CAs in the An. albimanus population in Tumbes, Peru.MethodsThe frequency and intensity of resistance to OPs and CAs was quantified through bioassays of female An. albimanus collected between 2012 and 2014, and the presence of insensitive AChE was confirmed using biochemical assays. A portion of the ace-1 gene flanking codon 119 was amplified and sequenced from individuals used in the bioassays and biochemical assays, as well as from historical samples collected in 2008. Statistical analyses were conducted to determine: (1) associations between genotype and AChE insensitivity; and, (2) associations between genotype and resistance phenotype.ResultsAfter confirming high levels of resistance to fenitrothion, malathion, and bendiocarb through bioassays, two novel polymorphisms were identified at the first and second loci of codon 119, with all individuals from the 2012–2014 collections being heterozygous at the first base (G/T) and either heterozygous (G/C) or homozygous mutants (C/C) at the second base. Based on sequence data from historical samples, these mutations arose prior to 2008, but became fixed in the population between 2008 and 2012. Homozygotes at the second locus had significantly higher levels of AChE insensitivity than heterozygotes (p <0.05). Individuals phenotypically susceptible to OPs and CAs were more likely to be heterozygous at the second locus (p <0.01). Cloning identified four individuals each containing three distinct genotypes, suggesting that a duplication of the ace-1 gene may have occurred.ConclusionsThe occurrence of heterozygotes at two loci and the presence of three genotypes in four individuals suggest that balancing selection could be maintaining OP and CA resistance in this population, while minimizing associated fitness costs.
Con el objetivo de establecer la variabilidad genética de Aedes aegypti determinada por el análisis del gen mitocondrial ND4, se analizaron 51 especímenes de Ae. aegypti en once regiones endémicas para dengue en el Perú. La variabilidad genética se determinó mediante la amplificación y secuenciación de un fragmento de 336 pares de bases del gen mitocondrial ND4. El análisis de filogenia intraespecífica se realizó con el programa Network Ver. 4.6.10; y el análisis filogenético, con el método de distancia Neighbor Joining. Se identificó la presencia de cinco haplotipos de Ae. aegypti agrupados en dos linajes: el primero agrupa a los haplotipos 1, 3 y 5 y el segundo agrupa los haplotipos 2 y 4, se muestra además la distribución geográfica de cada uno de los haplotipos encontrados. Se concluye que esta variabilidad se debe tanto a la migración activa de este vector como a la migración pasiva mediada por la actividad humana.
Sr. Editor. El Aedes aegypti cumple una función importante en la transmisión del virus del dengue en poblaciones humanas, particularmente en zonas tropicales y subtropicales del mundo. El mantenimiento de la circulación viral en la naturaleza en los periodos interepidémicos es un fenómeno estudiado en otros medios (1,2) , pero poco en el nuestro como en la Amazonía; por lo que se realizó un estudio para determinar la transmisión vertical del virus en el Aedes aegypti en localidades de la región Ucayali donde es persistente la presencia de brotes de dengue.Entre febrero y marzo de 2012 se colectaron muestras de huevos, larvas y pupas del vector A. aegypti, en zonas de brote de dengue en las localidades de tres distritos de Pucallpa. En total se colectaron 50 larvas y pupas (LP) en cada lugar. La colecta se hizo cumpliendo con las normas y medidas de protección personal que son las habituales para la vigilancia y control vectorial que se realiza en las diferentes regiones del país. Las muestras colectadas fueron enviadas al Laboratorio de Entomología del Instituto Nacional de Salud (INS) en Lima, donde se efectuó la crianza de LP hasta el estadio adulto del A. aegypti y su clasificación en mosquitos machos y hembras.En el Laboratorio de Metaxénicas Virales del INS, se determinó la presencia de ARN viral, mediante la prueba de RT-PCR en tiempo real en LP y RT-PCR en tiempo real en adultos (machos y hembras) (3,4) . Antes de aplicar la prueba se hicieron pools de LP y de adultos conformados por 2-10 unidades de cada lugar colectado. Los resultados se muestran en la Tabla 1, donde se observa que en muestras de adultos se logró determinar la presencia de RNA del virus dengue serotipo 2 (DENV-2) en mosquitos adultos hembras, en 6 de las 10 localidades estudiadas.Este estudio ha permitido determinar la presencia de DENV-2 a partir de mosquitos A. aegypti criados en laboratorio, lo cual indicaría la ocurrencia de transmisión transovárica en este vector, que por primera vez se describe en nuestro medio. Esta forma de transmisión podría explicar la persistencia de casos de dengue en las áreas estudiadas. La determinación de la presencia del virus del dengue en el A. aegypti en estadio larvario, podría servir como un indicador de alto riesgo para reorientar la vigilancia vectorial y permitir medidas de prevención y control vectorial más adecuadas y oportunas.
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