Objetivo: Avaliar o conhecimento dos profissionais de Enfermagem sobre Sistematização da Assistência de Enfermagem (SAE). Métodos: Pesquisa exploratória, quantitativa, descritiva e analítica, realizada com 105 profissionais de Enfermagem assistenciais em Hospital Universitário no período de Janeiro à Maio de 2017. Foi aplicado questionário semiestruturado cujos dados foram apresentados por estatística descritiva e analítica adotando-se 5% de significância e 95% de confiança. Foram utilizados os testes de Mann-Whitney, Exato de Fisher e Qui-quadrado de Person para associação bivariada. Pesquisa aprovada pelo Comitê de Ética em Pesquisa, CAAE 57875216.2.0000.5207. Resultados: Amostra constituída de 74,3% Técnicos de Enfermagem e 25,7% Enfermeiros, prevalência do sexo feminino, solteiros, que não realizaram aperfeiçoamento sobre SAE. Conclusão: Existem lacunas no conhecimento sobre SAE, sendo necessário aprimorar o ensino nas instituições de formação técnica e superior, estimular a qualificação profissional e treinamento da equipe para utilização dos instrumentos relacionados ao Processo de Enfermagem.