A micromethod is described for the separation and quantitative determination of individual bile acids in duodenal content and bile. After a mild saponification procedure for splitting the taurine and glycine conjugates, the products are separated by thin-layer chromatography on silicagel layer with the solvent system //0-octane-ethyl acetate-acetic acid (60 ml + 35 ml + 5 ml) and determined by spectrofluorirrietry. A series of control experiments has been performed on the validation of the procedure. Values obtained for human subjects or experimental applications of the method are presented.Eine Mikromethode zur Trennung und quantitativen Bestimmung der einzelnen Gallensäure inDuodenal-Inhalt und Galle wird beschrieben, Nach milder Verseifung zur Spaltung der Taurin-und Glycinkonjugate erfolgt die Dünnschichtchromatographie auf Silicagel mit dem Laufmittel /jO-Oktan/Äthylacetat/Eisessig 60 ml + 35 ml -f-5 ml. IDie nachfolgende Bestimmung wird spektrofluorimetriseh durchgeführt. Zur Bewertung des Verfahrens wurde eine Serie von Kontrollversuchen durchgeführt. Werte für den Menschen oder Laboratoriumstiere und Beispiele klinischer oder experimenteller Anwendung der Methode werden mitgeteilt.Methods for the separation of individual bile acids from biological fluids include column and paper (1 -4), thin-layer (5-13) or gas-liquid (14-17) chromatography. Quantitative measurements of the metabolites are made by an in situ semi-quantitative approach (6, 7) or densitometry without elution of zones from paper or layer, by colorimetry (1-4, 9), fluorimetry (13, 18, 19), enzymatic methods (10, 12) following elution of the steroids, or gas chromatography using internal standards (14-17). Recently, the introduction of spectrofluorimetry and gas chromatography resulted in a considerable increase in the sensitivity and specificity of the methods. Determination of the individual free and conjugated bile acids in a large number of samples by gas chromatography appears to be rather laborious and the technique cannot be used for routine purposes. A procedure in which the individual conjugated bile acids are separated by thin-layer chromatography and quantitated by spectrofluorimetry overcomes this disadvantage.
Methods
StandardsAuthentic cholic and deoxycholic acid were obtained from Fluka AG, chenodeoxycholic and lithocholic acid from Koch-Light Ltd., taurochenodeoxycholic, taurodeoxycholic, taurolithocholic and glycolithocholic acid from Calbiochern Ltd., glycochenodeoxycholicandglycodeoxycholic acid were purchased from Sigma Chemical Corp. The purity of the standards was tested by thinlayer chromatography and phosphomolybdic acid reaction.Chromatography procedures Thin-layer chromatography was performed on Silicagel G Merck AG chromatoplates (20 20 cm and layer-thickness 0.2 mm). The plates were activated at 105°C for at least two hours and" were not equilibrated in the chamber before development. The steroids were applied on strips of 1.5-2.0 cm.
Solvent systems:A. /r0-Octane-ethyl acetate-acetic acid (50 ml + 40 ml + 10 ml) ...
A közmű-szolgáltatások fogyasztói árának általános hatósági csökkentése, a gazdasági és pénzügyi válság sújtotta magyar lakosságot "védő" kormányzati intézkedéssorozat részeként, mára szervesen betagozódott az európai közvéleményt egyaránt foglalkoztató kérdések sorába. A tagországok által eleddig szakpolitikai szinten kezelt témakör az általános politika szintjére emelkedett. Az árcsökkentéssel együtt járó, a közműcégeket az eddigieknél nagyobb mértékű tehervállalásra kényszerítő intézkedések következményei azonban egyelőre még nem ismertek. Az elemzés három magyarországi víziközmű-vállalkozás által előállított GDP megoszlását vizsgálja, az elmúlt években állandósult adóterhek következtében kialakult, valamint azok esetleges további növelése esetén bekövetkező szolgáltatói magatartás modellezésére tesz kísérletet. Az eredmények elemzése során pedig arra a következtetésre jut, hogy a vállalatokat eddigiekben terhelő elvonási arányok negatív irányba történő megváltoztatása, a jövőben fenntarthatatlan működésre kényszerítheti ezeket a vállalkozásokat.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.