This study evaluated the antifungal activity of Persea americana extract on Candida albicans biofilm and its cytotoxicity in macrophage culture (RAW 264.7). To determine the minimum inhibitory concentration (MIC), microdilution in broth (CLSI M27-S4 protocol) was performed. Thereafter, the concentrations of 12.5, 25, 50, 100, and 200 mg/mL ( = 10) with 5 min exposure were analyzed on mature biofilm in microplate wells for 48 h. Saline was used as control ( = 10). After treatment, biofilm cells were scraped off and dilutions were plated on Sabouraud dextrose agar. After incubation (37 ∘ C/48 h), the values of colony forming units per milliliter (CFU/mL) were converted to log 10 and analyzed (ANOVA and Tukey test, 5%). The cytotoxicity of the P. americana extract was evaluated on macrophages by MTT assay. The MIC of the extract was 6.25 mg/mL and with 12.5 mg/mL there was elimination of 100% of planktonic cultures. Regarding the biofilms, a significant reduction ( < 0.001) of the biofilm at concentrations of 50 (0.580 ± 0.209 log 10 ), 100 (0.998 ± 0.508 log 10 ), and 200 mg/mL (1.093 ± 0.462 log 10 ) was observed. The concentrations of 200 and 100 mg/mL were cytotoxic for macrophages, while the concentrations of 50, 25, and 12.5 mg/mL showed viability higher than 55%.

Produtos naturais, como extratos glicólicos de plantas, são importantes para a aplicação clínica na área da saúde, como em enxaguatórios bucais, cremes dentais e irrigação intracanal. Assim é necessário realizar estudos de citotoxicidade desses extratos glicólicos. O presente estudo buscou avaliar a atividade citotóxica dos extratos glicólicos de Cynara scolymus L. (alcachofra), Myracrodruom urundeuva Allem. (aroeira-do-sertão-do-sertão) e Camellia sinensis (L.) Kuntze (chá verde) em macrófagos de camundongo (RAW 264.7) pelo teste de atividade metabólica MTT. Para tanto, as células foram distribuídas em microplacas de 96 poços e foram expostas a 11 diluições seriadas de cada extrato (200 mg/mL,100 mg/mL, 50 mg/mL, 25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 6,25 mg/mL, 3,13 mg/mL, 1,56 mg/mL, 0,78 mg/mL, 0,39 mg/mL e 0,20 mg/mL), sendo n=8 para cada diluição. Após o tempo de contato de 5 minutos e 24 horas, foi avaliada a viabilidade celular utilizando o teste MTT. Diante destes resultados, no tempo de exposição de 5 minutos com os extratos, em ordem crescente de redução da viabilidade celular, seguiram-se o chá verde, com aumento da viabilidade celular, a aroeira-do-sertão e o extrato de alcachofra. Por meio do MTT dos três extratos por tempo de exposição de 24 horas, observou-se que o extrato de alcachofra apresentou maior toxicidade, seguido do extrato de chá verde e aroeira-do-sertão. A análise estatística foi realizada por ANOVA e teste de Tukey, com significância de 5%. Conclusões: Entre os extratos, o chá verde com 12,5mg/mL, com interessantes 5 minutos e 24 horas, despertou atenção, pois foi a maior concentração e não apresentou citotoxicidade para os macrófagos, assim como a alcachofra que foi a mais citotóxica para os macrófagos, em ambos os tempos (5 min e 24 h).

Atividade citotóxica e anti-inflamatória do extrato glicólico de Camellia sinensis (L.) Kuntze em macrófagos (RAW 264.7) estimulados por LPS / Cytotoxic and antiinflamatory activity of the glycolic extract of Camellia sinensis (L.) Kuntze in LPS-stimulated machrophages (RAW 264.7) ABSTRACT Plant extracts can be a source of diverse biologic activities, as anti-inflammatory action, which is an interesting characteristic for mouthwashes, toothpastes and intracanal medication. This study aimed to evaluate cytotoxic and anti-inflammatory activity of Camellia sinensis (L.) Kuntze (green tea) glycolic extract in mouse macrophages (RAW 264.7). Cytotoxic activity was measured by the metabolic activity of MTT test, macrophages were distributed in 96 wells and exposed to 11 serial dilutions of each extract (200 mg/mL to 0.20 mg/mL). After 5 min and 24 h of contact, cell viability was assessed. Then, the extract at concentrations of 3.13 mg / mL and 12.5 mg / mL, were chosen to verify antiinflammatory activity. For this, after exposure time of 5 min or 24 h to the extract, supernatants of LPS-stimulated RAW 264.7 cultures were collected to quantify pro-inflammatory cytokines IL-1β and TNF-α by immunoenzymatic test (ELISA). The results were evaluated with statistical analyses (ANOVA and Turkey test), with p ≤ 0.05. Results: In MTT test green tea promoted increase cell viability in all concentrations at 5 min. The cell viability was greater than 100% in concentration of 0,20mg/mL to 12,5 mg/mL, at the time of exposure of 24h. The concentration of 12.5 mg/mL was the highest concentration less cytotoxic. The extract showed anti-inflammatory potential evidenced by the production decrease of IL-1β and TNF-α with better results at a concentration of 12.5 mg/mL 1096 for both exposure times. These results indicate promising immunomodulatory features of green tea. Therefore, this plant extract showed to be an interesting alternative to be inserted in medical or oral products or even as a source of active compounds. RESUMOExtratos de plantas podem ser fonte de diversas atividades biológicas. Dentre essas, a ação antiinflamatória se apresenta como uma das características de interesse para enxaguantes bucais, pastas dentais e medicações intracanais. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade citotóxica e antiinflamatória do extrato glicólico de Camellia sinensis (L.) Kuntze (chá verde) em macrófagos de camundongos (RAW 264.7). A atividade citotóxica foi medida pela atividade metabólica do teste de MTT, os macrófagos foram distribuídos em 96 poços e expostos a 11 diluições seriadas de cada extrato (200 mg / mL a 0,20 mg / mL). Após 5 min e 24 h de contato, a viabilidade celular foi avaliada. Então, o extrato nas concentrações de 3,13mg/mL e 12,5 mg / mL , foram escolhidas para verificar a atividade anti-inflamatória. Para isso, após a exposição do extrato por 5 minutos ou 24 horas, os sobrenadantes das células RAW 264.7 foram coletados para quantificação das citocinas pró-inflamatórias IL-1β e TNF-α pelo teste imunoenzimático ELISA...

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