Реферат: Вивчено особливості поведінки у культурі in vitro кріоконсервованих і свіжовиділених мультипотентних стромальних клітин (МСК) тимуса мишей лінії СВА. Даний тип клітин має певний поверхневий імунофенотип та високу здатність до диференціювання за остео-та адипогенним напрямками у спеціальних середовищах. Після культивування у скляних чашках Петрі, пластикових планшетах і на целофані свіжовиділені та кріоконсервовані клітини показували схожі властивості. При цьому свіжовиділені та кріоконсервовані МСК тимуса на скляній та пластиковій поверхнях формували фібробластні колонії, а на целофані спостерігався їх зливний рост. Встановлено, що МСК тимуса мають мембранну спорідненість до тимоцитів, лімфоцитів лімфатичних вузлів і клітин фетальної печінки. Це обумовлює їх здатність до контактної взаємодії з різними гемопоетичними клітинами з формуванням асоціацій у вигляді фібробласто-лімфоцитарних розеток (ФЛР). Найбільш ефективна контактна взаємодія (утворення ФЛР) здійснюється за участю МСК і тимоцитів, хоча значну кількість ФЛР утворюють також клітини лімфатичних вузлів і фетальної печінки мишей. Кріоконсервування МСК не впливає на їх здатність до контактної взаємодії, що підтверджує можливість використання кріоконсервування для створення відповідних клітинних трансплантатів. Ключові слова: кріоконсервування, мультипотентні стромальні клітини, тимус, клітини фетальної печінки, лімфоцити, культури клітин, контактна клітинна взаємодія. Реферат: Изучены особенности поведения в культуре in vitro криоконсервированных и свежевыделенных мультипотентных стромальных клеток (МСК) тимуса мышей линии СВА. Данный тип клеток имеет определенный поверхностный иммунофенотип и высокую способность к дифференцировки в остео-и адипогенном направлениях в специальных средах. После культивирования в стеклянных чашках Петри, пластиковых планшетах и на целлофане свежевыделенные и криоконсервированные клетки показывали схожие свойства. При этом свежевыделенные и криоконсервированные МСК тимуса на стеклянной и пластиковой поверхностях формировали фибробластные колонии, а на целлофане наблюдался их сливной рост. Установлено, что МСК тимуса имеют мембранное сродство к тимоцитам, лимфоцитам лимфатических узлов и клеток фетальной печени. Это обусловливает их способность к контактному взаимодействию с различными гемопоэтическими клетками с формированием ассоциаций в виде фибробласто-лимфоцитарных розеток (ФЛР). Наиболее эффективное контактное взаимодействие (образование ФЛР) осуществляется при участии МСК и тимоцитов, хотя значительное количество ФЛР образуют также клетки лимфатических узлов и фетальной печени мышей. Криоконсервирование МСК не влияет на их способность к контактному взаимодействию, что подтверждает возможность использования криоконсервирования для создания соответствующих клеточных трансплантатов. Ключевые слова: криоконсервирование, мультипотентные стромальные клетки, тимус, клетки фетальной печени, лимфоциты, культуры клеток, контактное клеточное взаимодействие.

The traditional source for regeneration of the immune system is hematopoietic stem cells. Multipotent stromal cells (MSCs), especially MSCs of the thymus, have been significantly less studied for this purpose.The aim was to study the regenerative, immunobiological and radioprotective properties of thymus-derived multipotent stromal cells.Materials and methods. Researches were conducted to study the effect of transplantation of thymus-derived MSCs on the survival and features of restoration of the immune system of lethally irradiated mice. Lethally irradiated (with dose 9 Gy) CBA mice, 5-6 weeks old, were injected intravenously with 5·104 thymus-derived MSCs. On the 30th day the cellularity of lymphoid organs, bone marrow and blood, natural and adaptive immunity were studied.Results. It was found that transplanted thymus-derived MSCs significantly prolonged the survival and average lifespan of mice, restored the cellularity of bone marrow, the ability of bone marrow stromal cells to form fibroblast colonies, greatly increased the cellularity of the thymus and contributed to the normalization of the number of leukocytes in the blood. In addition, the natural cytotoxic activity of splenocytes and their ability to synthesize α/β- and γ-interferons, significantly increased, the number of antibody-producing cells was stimulated and the synthesis of antibodies increased. The concentration of the tumor necrosis factor α in the blood was significantly reduced.Conclusions. The results indicate that thymus-derived MSCs possess pronounced regenerative and immunobiological activity, which provides these cells with radioprotective ability. The obtained data can be used to develop combined cell transplants and new methods for improving their regenerative potential and radioprotective effects.

Реферат: В роботі вивчали виживаність і середню тривалість життя 128 мишей лінії СВА, яким на наступний день після летального опромінення внутрішньовенно вводили 0,5 × 10 6 кріоконсервованих сінгенних клітин кісткового мозку (ККМ) або кріоконсервованих сінгенних клітин фетальної печінки (КФП) 14 діб гестації. У частині експериментів клітини із зазначених джерел після розморожування інкубували in vitro протягом 20 годин у присутності колоній мультипотентних стромальних клітин (МСК) тимуса. Встановлено, що контактна взаємодія з тимусними МСК значно підвищує виживаність мишей у результаті трансплантації гемопоетичних стовбурових клітин (ГСК) і прогеніторів різного ступеня зрілості. Преінкубовані з МСК тимуса ККМ підвищують виживаність опромінених мишей у пізній після опромінення період (через 14-16 тижнів-13% тварин, що вижили, при 0% у контролі). Клітини фетальної печінки, преінкубовані з МСК тимуса, підвищують виживаність мишей у ранній період (через 4 тижні-40% при 18% в контролі) і в 2,4 раза збільшують середню тривалість життя тварин. Результати дослідження можуть бути використані для вдосконалення трансплантатів ГСК і способів їх застосування. Ключові слова: гемопоетичні стовбурові клітини, кріоконсервування, клітини кісткового мозку, клітини фетальної печінки, мультипотентні стромальні клітини тимуса, міжклітинна контактна взаємодія, -опромінення. Реферат: В работе изучали выживаемость и среднюю продолжительность жизни 128 мышей линии СВА, которым на следующий день после летального облучения внутривенно вводили 0,5 × 10 6 криоконсервированных сингенных клеток костного мозга (ККМ) или криоконсервированных сингенных клеток фетальной печени (КФП) 14 суток гестации. В части экспериментов клетки из указанных источников после размораживания инкубировали in vitro в течение 20 ч в присутствии колоний мультипотентных стромальных клеток (МСК) тимуса. Установлено, что контактное взаимодействие с тимусными МСК значительно повышает выживаемость мышей в результате трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) и прогениторов разной степени зрелости. Преинкубированные с МСК тимуса ККМ повышают выживаемость облученных мышей в поздний после облучения период (через 14-16 недель-13% выживших животных при 0% в контроле). Клетки фетальной печени, преинкубированные с МСК тимуса, повышают выживаемость мышей в ранний период (через 4 недели-40% при 18% в контроле) и в 2,4 раза увеличивают среднюю продолжительность жизни животных. Результаты исследования могут быть использованы для совершенствования трансплантатов ГСК и способов их применения. Ключевые слова: гемопоэтические стволовые клетки, криоконсервирование, клетки костного мозга, клетки фетальной печени, мультипотентные стромальные клетки тимуса, межклеточное контактное взаимодействие, -облучение.

Трансплантація гемопоетичних стовбурових клітин (ГСК) і прогеніторів, представлених у препаратах клітин кісткового мозку (ККМ) і фетальної печінки (КФП), позитивно позначалася на показниках імунної системи летально опромінених мишей, гальмуючи розвиток кістковомозкового синдрому: суттєво збільшувалася маса та клітинність тимуса і кісткового мозку, а також зростала здатність стромальних клітин кісткового мозку до утворення фібробластних колоній. Значно підвищувалася природна цитотоксична і проліферативна активність лімфоцитів. Попередня інкубація з мультипотентними стромальними клітинами (МСК) тимуса ККМ призводила до суттєвого зростання імунологічних показників: збільшення на 35 % клітинності селезінки і на 20 % числа лімфоцитів у периферичній крові, стимуляції на 17 % природної цитотоксичності, на 47 % проліферативної активності Т-лімфоцитів, в 2,8 раза синтезу α/β-і в 1,7 раза g-інтерферонів, підвищення на 50 % вмісту спонтанного фактора некрозу пухлин α і активації антитілоутворення в 2,8 раза. Індуковані МСК тимуса КФП за деякими параметрами проявляли значно більшу активність: підвищення в 10,3 раза маси і в 6,8 раза клітинності тимуса, на 52 % кількості лімфоцитів, стимуляції на 69 % природної цитотоксичності, в 1,8 раза синтезу α/β-і в 2,9 раза g-інтерферонів, активації антитілоутворення в 2,7 раза. Дія ККМ і КФП іноді розрізнялася у кількісному відношенні, але завжди була однонаправленою. Результати можуть бути використані для розробки методів підвищення регенеративної і радіозахисної активності трансплантатів ГСК. Ключові слова: радіаційний імунодефіцит; регенерація; гемопоетичні стовбурові клітини; мультипотентні стромальні клітини; міжклітинна взаємодія; трансплантація.