Resumo. Gêmeos monozigóticos (MZ) derivam de um único zigoto e geralmente são indistinguíveis pela realização do teste genético padrão, o qual avalia marcadores do tipo repetições curtas consecutivas (Short Tandem Repeats, STR) que apenas confirmam a monozigosidade destes indivíduos. Contudo, outros marcadores genéticos estão sendo analisados para a diferenciação dos mesmos. O objetivo do presente artigo é apresentar, através de uma revisão bibliográfica, as tecnologias utilizadas para se obter a diferenciação de gêmeos MZ e as evidências genéticas que corroboram tais dados. Para isso, foram selecionados 68 artigos científicos sendo que seis destes tratavam especificamente do referido tema, mostrando a deficiência de estudos nesta área. Os descritores utilizados foram DNA, gêmeos monozigóticos, genética e diferenciação celular. Apenas em um caso, um padrão tri-alélico extremamente raro no marcador STR vWA foi utilizado para solucionar um caso criminal com gêmeos MZ. Por outro lado, a análise de polimorfismos de nucleotídeo único (Single Nucleotide Polymorphism, SNP) nucleares e do perfil de metilação do DNA têm se mostrado eficientes na diferenciação de gêmeos MZ. Além disso, a genotipagem do DNA mitocondrial também revelou diferentes perfis de SNPs entre estes indivíduos, com a vantagem do sequenciamento do genoma mitocondrial ser mais barato que o nuclear e ter maior possibilidade de tipagem em amostras com DNA degradado ou