Introducción: Las Infecciones Asociadas a la Atención en Salud (IAAS), son aquellas enfermedades que resultan por la presencia de un agente infeccioso microbiano, que no se encontraban identificadas, ni en periodo de incubación al momento de una valoración en cualquier establecimiento de salud, ingreso y estancia hospitalaria o después de un procedimiento.Objetivo: Valorar el conocimiento sobre IAAS en los estudiantes de quinto, sexto y séptimo nivel de la carrera de enfermería de la Universidad Técnica de Ambato.Material y métodos: Estudio observacional, descriptivo, de cohorte transversal, con muestreo probabilístico aleatorio, se utilizó el Instrumento de Conocimiento sobre Infección Asociada a Atenciones en Salud. La población de estudio estuvo conformada por 226 participantes.Resultados: Se pudo evidenciar que en relación con la subdivisión de conocimientos generales el 94,75 % tuvo un conocimiento correcto, en higiene de manos el 89,38 %, y en precauciones generales el 64,60 % aprobó, sin embargo, en la evaluación general del cuestionario el 76,55 % aprobó. Conclusiones: La población de los semestres altos de la carrera de enfermería posee un conocimiento apropiado sobre las infecciones asociadas en salud, sin embargo, existe discreta carencia a nivel de prevenciones generales sobre bioseguridad.