Objetivo. Diseñar y analizar las evidencias de validez de contenido, estructura interna y fiabilidad de un cuestionario de prácticas preventivas de hantavirus en una comunidad endémica en el contexto panameño. Materiales y métodos. Estudio cuantitativo de diseño instrumental. Esta investigación se desarrolló en cuatro etapas: revisión de literatura, validez de contenido a través de juicio de expertos con el método de agregados individuales y el cálculo de la V de Aiken; prueba piloto y validación psicométrica, a través del análisis factorial exploratorio (AFE) y análisis de fiabilidad de las puntuaciones del instrumento con el alfa ordinal. Resultados. Se evidenció validez de contenido y se reportó valores de V de Aiken superiores a 0,70 en el límite inferior del intervalo de confianza al 95%. En la estructura interna se identificó que los 8 ítems subyacen a un solo factor que explica el 60,70% de la varianza total de la prueba y con cargas factoriales superiores a 0,40; en el análisis de fiabilidad se obtuvo un valor de alfa ordinal de 0,84, valor considerado como bueno. Conclusiones. El cuestionario de práctica preventivas de hantavirus es un instrumento breve que muestra propiedades psicométricas aceptables para medir las actividades o conductas que realizan las personas para prevenir el hantavirus.