This work shows the ability of apolipoprotein A-I to influence the activity of lysosomal glycosidases in the liver of mice in a model of BCG-induced tuberculous inflammation. The aim of the investigation was to study the activity of lysosomal glycosidases in the liver of mice using a model of BCG-induced tuberculous inflammation after intravenous administration of apolipoprotein A-I. Material and methods. The studies were performed on male CBA mice weighing 20-22 g. Disseminated tuberculous inflammation was modeled by a single intraperitoneal injection of 0.5 mg of BCG vaccine. The activity of lysosomal glycosidases was assessed spectrofluorimetrically by the content of hydrolysis products of the corresponding fluorogenic substrates. Results. Tuberculous inflammation led to a pronounced decrease in the activity of lysosomal glycosidases in the liver. Thus, β-galactosidase was decreased 2.3 times, β-glucosidase – 2.8 times, β-glucuronidase – 2.5 times compared with healthy animals. Intravenous injection of apolipoprotein A-I to animals against the background of BCG infection prevented a significant decrease in the enzymatic activity of glycosidases and these values practically did not differ from the control values. Conclusions. Enzymatic activity of lysosomal glycosidases in the group of mice with intravenous administration of apolipoprotein A-I against the background of BCG infection was 1.5–2 times higher than the corresponding indicators in the group of animals with BCG-infection without administration of apolipoprotein A-I, i.e. without treatment.

Production of recombinant human apolipoprotein A-I (apoA-I) in E. coli cells is described and its biological properties are compared with those of natural protein. Recombinant apoA-I was isolated as a chimeric polypeptide and then processed to a mature form apoA-I (rapo-I). We studied the ability of the resulting protein to penetrate into hepatocyte nuclei and regulate the rate of DNA biosynthesis in complex with estriol. Penetration of rapoA-I conjugated with FITC into hepatocyte nuclei was demonstrated. rapoA-I-estriol and apoA-I-estriol complexes induced similar increase in DNA biosynthesis rate in isolated hepatocytes, which confi rms functional similarity of the obtained recombinant mature protein (rapoA-I) and native human apoA-I.

РезюмеЦель исследования -изучить активность лизосомальных хитиназ (хитотриозидазы и β-глюкозаминидазы) в печени мышей на модели БЦЖ-индуцированного туберкулезного воспаления после внутривенного введения аполипопротеина А-I. Материал и методы. Исследование выполнено на мышах-самцах СВА массой 20-22 г. Диссеминированное туберкулезное воспаление моделировали путем однократного внутрибрюшинного введения 0,5 мг вакцины БЦЖ. Активность хитиназ определяли с использованием флуоресцентных субстратов 4-метилумбеллиферил-β-D-N,N′,N′′-триацетилхитотриозиды и 4-метилумбеллиферил-N-ацетил-β-Dглюкозаминидина. Результаты и их обсуждение. БЦЖ-инфицирование животных через 4 недели вызывало значительное увеличение активности эндогенных хитиназ по сравнению с контрольной группой. Так, активность хитотриозидазы повышалась в 3,05 раза (р < 0,001), β-глюкозаминидазы -в 1,76 раза (р < 0,01). Внутривенное введение животным аполипопротеина А-I на фоне БЦЖ-инфицирования ингибировало повышенную активность ферментов, величины достоверно не отличались от контрольных значений. Заключение. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о способности аполипопротеина А-I снижать повышенную активность эндогенных лизосомальных хитиназ в печени мышей с БЦЖ-индуцированным туберкулезным воспалением.Ключевые слова: аполипопротеин А-I, туберкулезное воспаление, БЦЖ, лизосомальные хитиназы.Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Финансирование: Исследование проведено в рамках выполнения государственного задания Министерства науки и высшего образования Российской Федерации (регистрационный номер 122032300152-3) с использованием оборудования ЦКП «Спектрометрические измерения» и ЦКП «Протеомный анализ», поддержанного финансированием Минобрнауки России (соглашение № 075-15-2021-691).

No abstract