Since the development of the TIE (Toxicity Identification and Evaluation) in 1988 it has been assumed that the capacity of EDTA and sodium thiosulfate to complex some metals, and thus remove their toxicity, can be applied to both freshwater and seawater ecotoxicological tests and the results subsequently interpreted. However, it is now known that there is a wide variability in the extent of this complexation. In this context, the removal of toxicity caused by the presence of Hg(2+), Cd(2+), Cu(2+), Cr(6+), Zn(2+), Ni(2+), Pb(2+), Ag(1+) and Se(2+), through metal complexation by EDTA and sodium thiosulfate, in relation to the performance of embryo-larval tests with the sea urchin Arbacia lixula was investigated. It was observed that EDTA was capable of removing the toxicity of Pb(2+), Zn(2+) and Cu(2+) while sodium thiosulfate only reduced the toxicity of Ag(1+). Compared to the complexation observed in freshwater ecotoxicological tests, the complexing agents used in this study (EDTA and sodium thiosulfate) have a lower capacity to complex metals in the marine ecotoxicological test with A. lixula.

RESUMO O presente trabalho investigou o ouriço Arbacia lixula quanto ao seu tempo de desenvolvimento embrio-larval, tolerância do desenvolvimento em diferentes salinidades e temperaturas da água de manutenção, sua repetitividade diante de substâncias de referência para uso em testes de toxicidade e sua sensibilidade em comparação com outras espécies de ouriços normal-mente utilizadas no Brasil. O desenvolvimento embrionário de A. lixula a 25°C foi rápido, atingindo a fase de larva pluteus em menos de 24 horas, não necessitando prolongar o encerramento dos experimentos, entretanto, apresenta algumas desvantagens, como uma membrana de fecundação pouco nítida e, freqüentemente, um percentual de fecundação entre 70 e 80%. Nos experimentos de viabilidade dos embriões em diferentes salinidades e temperaturas demonstrou ampla tolerância, com desenvolvimento normal de 24 h para salinidades entre 29 e 39 e de 20 h para uma temperatura de 30 o C. Os testes de toxicidade realizados com substâncias de referência resultaram em valores de coeficientes de variação inferiores a 30% para cromo e zinco, demonstrando a repetitividade dos testes. Quando comparada com outras espécies de ouriço-do-mar (Lytechinus variegatus e Echinometra lucunter), A. lixula apresenta sensibilidade na mesma ordem de grandeza e resultados similares para amostras ambientais (elutriato de sedimentos).

RESUMONo Brasil, a Ecotoxicologia é uma ciência relativamente nova e com poucas espécies de uso rotineiro em testes de toxicidade. Larvas (Naupliu) de craca têm sido utilizadas por diferentes grupos de pesquisa no mundo como organismo-teste e com uma variedade de métodos e aplicações. Esse organismo tem como vantagens sua facilidade de obtenção em campo, disponibilidade ao longo do ano e fácil manipulação em laboratório. O uso desses organismos, no Brasil, ainda é limitado a testes da atividade de substâncias antiincrustantes e praticamente nada foi feito para investigar sua sensibilidade para uso na Ecotoxicologia. Este trabalho apresenta um protocolo de teste agudo utilizando larvas do Cirripedia Megabalanus coccopoma, um dos maiores exemplares da Subordem Balanomorpha e de ampla distribuição na costa brasileira. Foi investigada a sensibilidade de Naupliu II ante o sulfato de zinco e seu efeito sobre a mobilidade e a mortalidade. Naupliu de M. coccopoma foram obtidos de lamelas ovígeras de adultos e utilizados em testes de toxicidade sob efeito de sulfato de zinco, em experimentos estáticos de 48 horas e com a quantificação de organismos de baixa mobilidade e mortos a cada 12 horas. Nos testes de mobilidade a CE 50 Incipiente de 0,24 mg L -1 (Zn) foi obtida em 24 horas, enquanto a CL 50 Incipiente de 0,27 e 0,22 mg L -1 (Zn) ocorreu em 36 e 48 horas, respectivamente. Observou-se que não houve diferença significativa entre os valores de CE 50 e CL 50 , o que permite o desenvolvimento dos testes em 24 horas para mobilidade ou de 48 horas para o de mortalidade. Os valores de CE 50 e CL 50 para a espécie demonstram sensibilidade similar ao misidáceo Mysidopsis juniae e ao Copepoda Acartia lilljeborgi. ABSTRACT Barnacle larvae of Megabalanus coccopoma (Darwin, 1854) as toxicity test organismsIn Brazil, Marine Ecotoxicology is a retelatively new science with few species routinely used in toxicity tests. Barnacle larvae (Naupliu) have been used for different research groups in the world as test organisms with a variety of methods and applications. These organisms have the advantages of easy obtainment in the field, availability throughout the year and easy manipulation in the lab. The use of these organisms in Brazil is still limited to tests of the activity of anticrustant substances and few work has been done to investigate their sensitivity as test-organisms in Ecotoxicology. This work presents a standard operating procedure to perform toxicity tests with naupliu of the barnacle Megabalanus coccopoma one of the biggest examplers of the subordem Balanomorpha and of great distribution around the Brazilian coast. The sensitivity of naupliu II to Zinc (Zn) was evaluted through mobility and mortality endpoints. Nauplius of the M. coccopoma were obtained from egged lamels of adults and used in 48 hours toxicity tests to assess the effect of zinc sulphate in static experimental conditions; poorly mobile and dead organisms were quantified every 12 hours. On the mobility tests, the EC 50 of 0.24 mg L -1 (Zn) was obtained fo...

The aim of this study was to improve the methodological procedure for the evaluation of sea urchin (Lytechinus variegatus) sperm sensitivity in MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5 diphenyltetrazolium bromide) enzyme reduction assays with the formation of formazan (purple color) in the interior of viable cells. Assays were carried out with the reference toxicants sodium dodecyl sulfate (SDS), copper, zinc, cadmium and ammonium, using a sperm solution previously activated in sea water and a sperm solution prepared in sea water containing 400 μg L verapamil, which enabled activation of the sperm to occur only when exposed to the toxicants. The assays performed with sperm in verapamil presented similar sensitivity to that shown in the fertilization tests with copper, zinc and SDS, while the assays carried out with the pre-activated sperm solution presented greater resistance to the action of the toxicants. It appears that the action of verapamil involves an intracellular effect on the distribution of Ca ions and that the toxicants used prevent the metabolic reactivation of the sperm.