Objetivo: Fazer um levantamento sobre o conhecimento dos profissionais da saúde, nos hospitais, e graduandos dos cursos de Medicina e Enfermagem, relacionados com a aplicação da oximetria de pulso na triagem neonatal de cardiopatia congênita no Noroeste Paulista. Material e Método: Trata-se de um estudo transversal, de campo, quantitativo, no período de março a dezembro/2017. A amostra contou com 90 participantes distribuídos em três grupos: 55 graduandos de Medicina; 28 graduandos de Enfermagem e sete Profissionais/Hospitais e participação de sete hospitais. A coleta de dados deu-se por meio de um questionário com treze questões, respondido pelos voluntários. Os dados foram planilhados por meio dos programas Microsoft Office Excel, Word e o Statistical Package for Social Sciences (SPSS) versão/24.0 e utilizado a estatística descritiva. Resultados: Foi constatado que somente 63% dos hospitais participantes realizam a triagem neonatal. Com relação ao treinamento, 49% dos graduandos de Medicina e nenhum de Enfermagem passaram por treinamento. Entre os Profissionais que atendem nos hospitais, somente 28% receberam treinamento. Conclusão: Constatou-se a baixa adesão na realização da oximetria de pulso pelos hospitais públicos, com maternidade, dessa região; bem como o déficit de treinamento ofertado aos seus profissionais. Há necessidade de ampliar o conhecimento da oximetria de pulso para a comunidade acadêmica dos cursos de Medicina e Enfermagem, e ofertar treinamentos aos profissionais que atendem os recém-nascidos nos berçários.