This study evaluated occurrences of Leishmania infantum in dogs in the municipality of Palmas, Tocantins, comparing diagnostic data obtained using the polymerase chain reaction (PCR) and parasitological diagnosis. Blood samples and lymph node aspirates were collected from 63 dogs of males and females and various ages and races, with or without owners, between August 2009 and June 2010. Slides containing smears of lymph node aspirates were stained with Giemsa stained. In PCR, the 145 bp target sequence of the LT1 fragment, located in the Leishmania donovani kDNA minicircle was detected using the RV1 and RV2 oligonucleotide primers. The chi-square test revealed that there was a significant relationship between the symptoms and dogs that were positive for visceral leishmaniasis (VL). The parasitological investigation showed concordance of 66.7% with PCR on blood and 84.1% with PCR on lymph node aspirate. In addition to these tests, evaluations of the diagnoses in parallel and in series were conducted, which showed concordances with the parasitological test of 76.2% and 74.6%, respectively. The results make it possible to suggest that PCR on lymph nodes should be used in evaluating large populations (surveys) and that the parasitological test should be used for initial clinical evaluations in veterinary consultation offices.Keywords: PCR, blood, lymph node aspirate, parasite, diagnosis. ResumoAvaliou-se a ocorrência de Leishmania infantum em cães do município de Palmas-TO, comparando dados diagnósticos obtidos pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e pelo diagnóstico parasitológico. Foram coletadas amostras de sangue e de aspirado de linfonodo de 63 cães machos e fêmeas, várias idades e raças, domiciliares ou não de agosto de 2009 a junho de 2010. As lâminas contendo esfregaço dos aspirados de linfonodos foram coradas pelo corante Giemsa. Na PCR, a sequência alvo de 145 pb do fragmento LT1, situado no minicírculo do kDNA do grupo Leishmania donovani, foi detectada através dos oligonucleotídeos iniciadores RV1 e RV2. O teste χ 2 (Qui-quadrado), demonstrou haver relação significativa entre a sintomatologia e a positividade dos cães para Leishmaniose Visceral (LV). O exame parasitológico mostrou uma concordância de 66,7% com a PCR em sangue e 84,1% com a PCR de aspirado de linfonodo. Além destas análises, houve a avaliação dos diagnósticos em paralelo e em série, onde as concordâncias com o exame parasitológico foram de 76,2% e 74,6%, respectivamente. Os resultados permitem sugerir a utilização da PCR de linfonodos na avaliação de grandes populações (inquéritos), e o exame parasitológico para a avaliação clínica inicial em consultórios veterinários.Palavras-chaves: PCR, sangue, aspirado de linfonodos, parasita, diagnóstico.
Landscape features can influence gene flow detected in genetic structure and diversity. The effect will depend on the ability to disperse and may vary between species. Waterfalls and rapids in the Amazon basin have been suggested as causing the diversification and genetic structure of freshwater species, including turtles. Thus, we evaluated the spatial distribution of genetic diversity of Podocnemis unifilis, a widely distributed and endangered turtle, along the main rivers of the Brazilian Amazon. We used the mitochondrial DNA control region to characterize the population structure and test hypotheses of isolation by distance (IBD) or resistance (IBR) through an integrative approach using genetic, geographic, and ecological data. We compared matrices of geographic (linear and in-water distance) and resistance distances (niche modeling and/or waterfalls and rapids) in genetic distance. We found heterogeneous levels of genetic diversity (no spatial patterns) and a geographically complex pattern of population genetic structure. In some localities, gene flow follows watersheds, connecting watercourses, but it also has some genetic structure withing rivers, where waterfalls and rapids act as barriers to dispersal. The IBR better explains the genetic distance, the movement of individuals is influenced by aquatic, vegetational, biological, and geomorphological variables. Efforts for the conservation of the species need to be applied in all its distribution considering landscape genetics. Thus, projects that impact aquatic organisms such as dams and others need to rely on regional or even local migration of Amazonian turtle populations in rivers, verifying the connectivity within each watercourse, improving the knowledge of negative impacts.
Os quelônios são animais de vida longa e poucos dos seus indivíduos chegam à fase adulta. Além da baixa taxa natural de recrutamento, diversas ações antrópicas vêm dificultando a manutenção das populações desse grupo. A exploração desordenada para abastecer o comércio ilegal vem se mostrando a mais danosa, principalmente em Podocnemis expansa, por ser uma espécie bastante apreciada na culinária amazônica, e muito vulnerável no período reprodutivo, época de maior captura. Seu histórico de exploração causou desequilíbrio populacional em diversas localidades na Amazônia, como pôde ser verificado durante as quase três décadas de monitoramento em importantes sítios de desova em unidades de conservação do rio Araguaia. O presente estudo desenvolveu marcadores moleculares com o objetivo de testá-los e compará-los com primers já utilizados, além de avaliar a diversidade genética e a estruturação populacional de P. expansa na bacia Tocantins-Araguaia. Para isso, foi coletado tecido cutâneo de 120 espécimes amostrados em três localidades no médio e submédio rio Araguaia, comparados com sequências do DNA mitocondrial de 22 localidades. A região controle do DNA mitocondrial de P. expansa é de difícil amplificação, sendo que o par de primers de outros estudos não amplificou com o material biológico utilizado neste trabalho, mostrando a eficiência do marcador molecular confeccionado. A utilização desses primers facilitará a amostragem em campo, pois, apesar de o tecido cutâneo conferir menor quantidade de DNA extraído quando comparado ao tecido sanguíneo, sua coleta como material biológico pode ser aplicada de forma mais simples, ampla e frequente em projetos de pesquisa e programas de monitoramento e manejo de quelônios, facilitando as pesquisas genéticas com esses animais. Quanto à avaliação genética, foi caracterizada panmixia na bacia Tocantins-Araguaia e baixa diversidade genética, concordando com dados da espécie. Caso as estratégias de conservação não sejam eficientes para reverterem um provável processo de deriva genética, poderão ocorrer prejuízos populacionais significativos, notadamente quanto às questões adaptativas da espécie.
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