Estimating pollen viability is important for analyzing genetic flow, evaluating the masculine reproduction potential of a species, and for genetic improvement programs. In order to gather more information about different pepper accessions (Capsicum sp) held in the Active Germplasm Bank of the Federal University of Piauí (BAG-UFPI), Brazil, we analyzed the pollen viability of eight pepper accessions using four colorimetric methods: 2% acetic carmine; 2% acetic orcein; fuchsin; and Lugol's iodine. Pre-anthesis floral buds were collected and fixed in ethanol:acetic acid (3:1) for 24 hours and subsequently held in 70% ethanol under refrigeration until the slides were prepared using the squashing technique. An entirely randomized methodology was used, and the data compared using the Scott-Knott test at a 5% probability level. The four colorimetric methods were found to be efficient for estimating pollen viability in the different plant accessions, with all of them demonstrating high pollen viability (above 70%)-an important index for studies of genetic improvement.
O feijão-fava (Phaseolus lunatus L.) é uma importante fonte de alimento para o Brasil principalmente para a região Nordeste. Devido à relevância dessa leguminosa, estudos em melhoramento genético se fazem necessários, sendo que informações sobre a viabilidade polínica constitui um dos fatores responsáveis pelo sucesso dos programas de melhoramento via hibridação. Com o intuito de fornecer informações a respeito dos acessos de feijão-fava provenientes do Banco Ativo de Germoplasma da Universidade Federal do Piauí (BAG-UFPI), objetivou-se estimar a viabilidade polínica de nove acessos, através de quatro métodos coloriméticos: carmim acético 2%, orceína acética 2%, fucsina e lugol. Foram coletados os botões florais na pré-antese e fixados em etanol:ácido acético (3:1) por 24 horas e, posteriormente, permaneceram em etanol 70% sob refrigeração até a preparação das lâminas pela técnica de esmagamento. Foi utilizado um delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial e os dados foram comparados pelo teste Scott-Knott ao nível de 5% de probabilidade de erro. Os quatro métodos colorimétricos foram eficientes em estimar a viabilidade entre os acessos, os quais apresentaram alta viabilidade polínica com valores acima de 70%, importante para viabilização dos trabalhos de melhoramento genético.
Cajui (Anacardium spp.) is a native fruit tree (small cashew) of the Brazilian Cerrado and possesses the potential for commercialization. However, cajui exploitation occurs exclusively through extractivism in the absence of conservation strategies. The lack of conservation strategies may lead to a decrease in genetic diversity of Anacardium. In this work, the genetic diversity and population structure of three natural populations in Sete Cidades National Park (PNSC; PI, Brazil) were assessed using ISSR analysis of 56 cajui accessions and two A. occidentale accessions (outgroup) from Pacajus (CE, Brazil). A total of 112 markers were obtained, 93 (83.04%) of which were polymorphic. The diversity indices of these populations indicated moderate levels of genetic diversity. According to AMOVA, 96.17% of the genetic variability lay within populations, with low genetic differentiation among populations (ΦST = 0.03828). Furthermore, STRUCTURE analysis indicated the existence of four connected genetic groups. The findings show that the individuals from the three collection sites did not represent different subpopulations, likely due to the high gene flow (Nm = 6.7) favored by the floral biology of Anacardium, pollinators and small-animal seed dispersers. This research identifies genetically divergent individuals (C-03, C-05, C-22, C-26, C-34 and C-39), which should be considered priority individuals for conservation and can inform conservation programs for Anacardium spp.
RESUMOO ipê-amarelo (Handroanthus serratifolius) é uma espécie com grande potencial econômico devido ao uso da sua madeira e de diversos compostos com propriedades medicinais. Devido a sua importância econômica faz-se necessário o desenvolvimento de estudos moleculares que visam a caracterização genética dessa espécie. Uma vez que os estudos moleculares requerem um DNA puro e íntegro, o objetivo desse trabalho foi avaliar cinco métodos de extração de DNA genômico total em H. serratifolius: Dellaporta et al. (1983), Doyle e Doyle (1987), Clarke et al. (1989), Ferreira e Grattapaglia (1995) e Romano e Brasileiro ( 1998), com o objetivo de modificá-los e identificar o protocolo mais eficiente. O DNA foi extraído do tecido foliar e do caule de árvores de H. serratifolius e foi realizada na presença e na ausência de nitrogênio líquido. Com base nos resultados, foi possível identificar que o protocolo mais eficiente para a extração de DNA em H. serratifolius foi o descrito por Clarke et al. (1989), utilizando-se nitrogênio líquido na maceração. O DNA foliar apresentou uma concentração de 889,4ng/µl, com relação A 260/280 de 2,03 e relação A 260/230 de 0,64. Nos protocolos descritos por Dellaporta et al. (1983), Ferreira e Grattapaglia (1995) e Romano e Brasileiro (1998) obteve-se, respectivamente, os seguintes valores médios de concentração de DNA: 446,3ng/µl, 773,9ng/µl e 529,2ng/µl. A relação A 260/280 foi de 1,87, 1,70 e 2,09; já para a relação A 260/230 os valores obtidos foram 0,73, 1,20 e 0,68, respectivamente. O método descrito por Doyle e Doyle (1987) não apresentou ácido nucleico nas amostras analisadas. Nas extrações em que não utilizou-se nitrogênio líquido, o protocolo mais eficiente também foi o descrito por Clarke et al. (1989), gerando um DNA com concentração de 1371ng/µl, a relação A 260/280 foi de 1,75 e a relação A260/230 foi de 0,95. Entretanto, os outros quatro protocolos também apresentaram resultados satisfatórios em relação à pureza do DNA. Para a extração de DNA a partir do caule, o protocolo mais eficiente, quantitativamente, para a extração de DNA de H. serratifolius foi o descrito por Dellaporta et al. (1983), na ausência de nitrogênio líquido durante a maceração. Sugere-se também o protocolo de Clarke et al. (1989) por ter sido o mais eficiente qualitativamente, na extração de DNA a partir do caule, sem a utilização de nitrogênio líquido.
“Sucupira branca” is a plant found in the Brazilian Cerrado and is adapted to low fertility soils, and its fruit extract has anti-inflammatory, healing, antiulcerogenic, antimicrobial, cercaricidal, leishmanicidal and antioxidant activities. Furthermore, it provides protection against oxidative stress, is a natural biocontrol agent of Aedes aegypti, has very resistant wood, is a melliferous plant and has been used in reforestation programs. The development of conservation strategies is important for maintaining diversity in natural populations of “sucupira branca” since these populations are in the process of genetic erosion. Molecular biology techniques, which are important for characterizing the genetic diversity of plants to develop conservation strategies, require sufficient high-quality genomic deoxyribonucleic acid (DNA). This study aimed to compare five methods to extract DNA from “sucupira branca”. The quality and concentration of DNA were revealed by agarose gel electrophoresis, and only the protocols of Dellaporta, Wood and Hicks et al. (1983) and Khanuja et al. (1999) did not result in satisfactory quantities of DNA. When PCR (Polymerase Chain Reaction) was performed with three inter-simple sequence repeat (ISSR) primers, DNA was successfully amplified from extractions performed with the protocols proposed by Doyle and Doyle (1987), Romano and Brasileiro (1998) and Ferreira and Grattapaglia (1995), which are less expensive than commercial purification kits. These protocols resulted in DNA of sufficient quality and quantity after the amplification reactions were performed.
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