Los brasinoesteroides son fitohormonas esteroidales que se han utilizado ampliamente en la agricultura, se han realizado pocos estudios sobre el efecto que pueden tener para inducir la formación de raíces en esquejes de arándano (Vaccinium corymbosum). El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto del 24-epibrasinolide (24-EBL) a distintas concentraciones (0, 20, 40 y 60 μg L-1) y del sustrato sobre el enraizamiento de esquejes, se utilizó mezcla de arena de río y tezontle (AT), turba (Peat Moss®) y perlita (PMP), mezcla de fibra de coco y perlita (FCP), turba (Peat Moss®) (PM) y fibra de coco (FC). Las variables evaluadas a los 30 días después de establecido del experimento, fueron porcentaje de supervivencia (%SE), porcentaje de esquejes enraizados (%ER), número de raíces por esqueje (NR), longitud de raíz principal (LRP) y longitud total del sistema radicular (LTR). Los datos obtenidos se sometieron a análisis de varianza y comparación de medias con la prueba de Tukey. Los resultados mostraron que los esquejes de arándano con 24-EBL a una concentración de 60 μg L-1 en sustrato de AT presentan 84.7% de supervivencia y 67.76% de esquejes enraizado. Los esquejes expuestos a 24-EBL a una concentración 40 y 60 μg L-1 insertada en sustrato de mezcla de AT presentaron una mayor longitud de raíz y más raíces por esqueje en comparación con otros sustratos. Se concluye que el 24- EBL induce la formación de raíces en esquejes de plantas de arándano en sustrato de AT.