Pela análise de 39 locos isoenzimáticos polimórficos, estimaram-se as freqüências alélicas referentes a 267 indivíduos de 12 populações naturais de Cryptocarya aschersoniana provenientes de Florestas de Planalto do estado de São Paulo e sul de Minas Gerais, Brasil. Foram obtidas estimativas das estatísticas F de Wright pelo método da análise da variância para estimação não viesada dos parâmetros correspondentes F=F IT, θ P =F ST e f=F IS. Os valores médios obtidos de F^ resultaram em 0,552 < 0,415 < 0,275; os de θ^P foram 0,395 < 0,335 < 0,279; e os de f^ sendo 0,292 < 0,119 < -0,039. Esses resultados indicaram que os indivíduos dentro das populações devem ser panmíticos e que a diversidade entre populações foi bastante alta, sendo superior à que poderia se esperar para famílias com estruturação de irmãos-germanos. Calculando-se θ^P com as populações tomadas duas a duas, testou-se o modelo de isolamento pela distância que se mostrou inadequado para explicar a divergência encontrada entre as populações. O fluxo gênico estimado de 0,4 indivíduos por geração corroborou a pronunciada diferenciação populacional. Devido aos valores insignificantes encontrados de fˆ @ F^IS, o tamanho efetivo de variância de cada população foi equivalente ao número de indivíduos amostrados. Sob um contexto metapopulacional, considerando-se as 12 populações amostradas para a espécie, o tamanho efetivo populacional foi de 15,4 indivíduos (5,77%) para o total amostrado, indicando que a amostragem de diferentes populações deve ser uma estratégia importante para seu manejo.
A variabilidade genética e estrutura de populações naturais de Cryptocarya aschersoniana Mez foram investigadas através de isoenzimas. Amostras de folhas de 267 indivíduos adultos foram coletadas de 12 populações procedentes de "Florestas de Planalto" do estado de São Paulo e sul de Minas Gerais, Brasil. A partir de 39 locos alozímicos polimórficos analisados, a divergência obtida através das estimativas de G ST sugerem a existência de deriva genética significativa e/ou de efeitos de seleção natural entre populações. O nível de diferenciação gênica (ĜST = 0,340) foi extremamente alto. A diversidade gênica dentro das populações (H S = 0,365) foi responsável por 66,12% da diversidade gênica total, indicando a existência de uma maior variabilidade ocorrendo dentro das populações do que entre as mesmas. Os testes de aderência ao Equilíbrio de Mutação e Deriva indicaram que nenhuma dessas populações encontra-se em equilíbrio. A partir da distância de Reynolds, verificou-se que as divergências entre os pares de populações foram também relativamente altas, sendo que poderiam estar associadas a efeitos de gargalo populacional devido à fragmentação florestal presente nas populações analisadas.
Resumo -Este trabalho teve como objetivo a obtenção de híbridos somáticos entre o limão 'Cravo' (Citrus limonia Osbeck) e a tangerina 'Cleópatra' (Citrus reshni Hort.), para serem usados como portaenxertos de citros. O limão 'Cravo' é atualmente o principal porta-enxerto comercial utilizado no Brasil, em virtude de suas boas qualidades agronômicas. Entretanto, é suscetível ao "declínio" dos citros, doença responsável pela eliminação anual de milhões de plantas cítricas no Brasil. A tangerina 'Cleópatra' é uma espécie bastante utilizada como porta-enxerto em outros países e tem sido descrita na literatura como tolerante ao "declínio". Protoplastos de suspensões celulares embriogênicas e protoplastos derivados de tecidos foliares foram utilizados para fusão com solução de PEG (50%) e posterior cultivo em agarose. A porcentagem de obtenção de células híbridas interespecíficas logo após a fusão, variou entre 5,1% e 6,8%. Foram obtidas mais de 500 plantas a partir de produtos de fusão cultivados em gotas de agarose. No total de 180 plantas avaliadas, 11 híbridos somáticos foram discriminados e confirmados, utilizando-se marcadores moleculares RAPD e isoenzimáticos (sistemas PO, IDH e PGI). Seis plantas foram aclimatizadas, plantadas no solo e estão sendo multiplicadas por estaquia para avaliação futura como porta-enxertos de citros.Termos de indexação: protoplastos, marcador genético, polimorfismo genético, porta-enxerto, citros. Somatic hybridization between 'Rangpur' lime and 'Cleópatra' mandarinAbstract -The aim of this work was to obtain somatic hybrids between 'Rangpur' lime (Citrus limonia Osbeck) and 'Cleópatra' mandarin (Citrus reshni Hort.), to be used as a citrus rootstock. 'Rangpur' lime is the most important Brazilian citrus rootstock due to its higher horticultural performance. Nevertheless, this species is susceptible to blight disease, which is responsible for the death of millions of productive trees per year in Brazil. 'Cleópatra' mandarin has become an increasingly important rootstock in other countries and has been reported as being tolerant to citrus blight disease. Leaf protoplasts and protoplasts from embryogenic cell suspension cultures were fused using PEG solution (50%) and further cultivation in agarose. The frequency of heterokaryon formation was 5.1% to 6.8%. More than 500 plants were regenerated from these fusion experiments and 180 were tested. Among them, 11 plants were confirmed to be a somatic hybrid by means of molecular markers (RAPD) and isoenzymes markers (PO, IDH and PGI systems). Six plants were acclimatized, planted in the soil and have been multiplied by cuttings in order to evaluate their potential as citrus rootstocks.
This study was accomplished on a more comprehensive basis to evaluate previous questions that were raised from a preliminary article about the genetic structure of Cryptocarya moschata populations. Thus, through the analysis of 40 polymorphic allozyme loci, allele frequencies were estimated from 335 individuals of 11 natural populations of C. moschata from six hydrographic basins of São Paulo state and Serra da Estrela, Rio de Janeiro, Brazil. Estimates of Wright's F statistics were done through the analysis of variance, presenting average values of <img border=0 width=32 height=32 id="_x0000_i1026" src="../../../../../../img/revistas/bn/v4n1/img/a04car(f).jpg" align=absmiddle > or = 0.352, <img border=0 width=32 height=32 id="_x0000_i1027" src="../../../../../../img/revistas/bn/v4n1/img/a04car(0p).jpg" align=absmiddle > or = 0.285 and <img border=0 width=32 height=32 id="_x0000_i1028" src="../../../../../../img/revistas/bn/v4n1/img/a04car(f2).jpg" align=absmiddle > or = 0.097. These results indicated that individuals within populations must be panmitic, and that the diversity among populations is fairly high, being superior to what would be expected for groups of plants having a full-sib family structure. From estimates of <img border=0 width=32 height=32 id="_x0000_i1029" src="../../../../../../img/revistas/bn/v4n1/img/a04car(0p).jpg" align=absmiddle>obtained for populations taken two at a time, the model of isolation by distance was tested; data did not fit the model, showing that <img border=0 width=32 height=32 id="_x0000_i1030" src="../../../../../../img/revistas/bn/v4n1/img/a04car(0p).jpg" align=absmiddle>did not increase by the respective increasing of the geographic distance. The estimated gene flow of 0.55 migrants per generation corroborated the pronounced populational differentiation, indicating that drift effects should be more important than the selection ones. The effective population sizes found from the sampled populations showed that there was an adequate genetic representativeness of the samples for those with relatively low values of <img border=0 width=32 height=32 id="_x0000_i1031" src="../../../../../../img/revistas/bn/v4n1/img/a04car(f2).jpg" align=absmiddle>. Though, under a metapopulation context, the effective population size was 17.07 individuals, indicating that sampling performed for the species corresponded to 88.44% of the maximum effective size obtained from 11 populations with a <img border=0 width=32 height=32 id="_x0000_i1032" src="../../../../../../img/revistas/bn/v4n1/img/a04car(0p).jpg" align=absmiddle>of 0.285, equivalent to only 5.09% individuals for the total sampled. Management and conservation strategies aimed at preserving high intrapopulation genetic variation in C. moschata would imply in the maintenance of populations with great number of individuals. Moreover, for the preservation of the species as a whole, the maintenance of many such populations would be mandatorily recommended, which denotes that the conservation of large areas of Atlantic rain forest should be necessary to hold its evolutionary dynamics.
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