TRABAJOS ORIGINALES© Los autores. Este artículo es publicado por la Revista Peruana de Biología de la Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Este es un artículo de acceso abierto, distribuido bajo los términos de la Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional.(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/), que permite el uso no comercial, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que la obra original sea debidamente citadas. Para uso comercial, por favor póngase en contacto con editor.revperubiol@gmail.com. Fuentes de financiamiento: El presente trabajo se realizó gracias al financiamiento del canon minero otorgado a la Universidad Nacional de Trujillo. Información sobre los autores:MA que realizó la parte experimental. LS-T realizó la parte experimental. ZP realizo el diseño experimental y planificación; MA, LS-T, ZP revisaron y aprobaron el manuscrito.Los autores no incurren en conflictos de intereses. Presentado:04/01/2017 Aceptado:22/09/2017 Publicado online: 28/10/2017 ResumenEl objetivo del trabajo fue realizar la estandarización de los protocolos moleculares, diferenciar los linajes de la tilapia roja y gris mediante microsatélites de ADN y evaluar los marcadores SCAR-5F-X/5R y SCAR-5F/5R-Y como indicadores del sexo genético de O. niloticus. El microsatélite UNH106 permitió diferenciar genéticamente los linajes de la tilapia roja de la gris. Los microsaté-lites UNH136, UNH115 y UNH995 presentaron loci monomórficos tanto en la tilapia roja como en la gris en el lote poblacional del Centro Experimental de Genética de la Universidad Nacional de Trujillo. Se describen los tamaños de fragmentos para los microsatélites y del gen de referencia β actin. También se confirmó la efectividad de los marcadores SCAR como informativos en la determinación del sexo genético evaluados en hembras XX y YY y machos XY y YY de O. niloticus roja y hembras XX y machos XY de O. niloticus gris.Palabras clave: Tilapia; Oreochromis; microsatélites; marcadores SCAR; determinación del sexo. AbstractThe aims of this work was to develop a standardized molecular protocols, to differentiate red and gray tilapia lineages using DNA microsatellites and to evaluate SCAR-5F-X/5R and SCAR-5F/5R-Y markers associated with the phenotypic sex of O. niloticus. The UNH106 microsatellite allowed differentiating genetically the lineages of red tilapia from gray. The markers UNH136, UNH115 and UNH995 presented monomorphic loci in both the red and gray tilapia in the population stock of the Centro Experimental de Genética of the Universidad Nacional de Trujillo. Fragment sizes for microsatellites and the reference gene β actin are described. The effectiveness of SCAR markers as informative in the determination of the genetic sex in XX and YY females and XY y YY males of red tilapia and XX females and XY males of gray tilapia was also confirmed.
En la presente investigación se realizó el ensayo in vivo del extracto de C. spinosa como un controlador de F. columnare en individuos de tilapia. Para lo cual, se obtuvo el extracto de frutos secos de C. spinosa y se mezcló con el agua de cultivo para peces a la concentración final de 0.14 mg/ml en acuarios de 280 l. En la primera etapa, los peces de tilapia infectados artificialmente con F. columnare manifestaron los síntomas de la enfermedad. En la segunda etapa, los peces enfermos fueron tratados con el extracto de C. spinosa disuelto en el agua de cultivo y se mantuvieron hasta su recuperación. En el grupo de individuos enfermos que no recibieron C. spinosa, el porcentaje de sobrevivencia fue 53,33. Los peces criados con y sin C. spinosa no mostraron diferencias en el porcentaje de sobrevivencia entre ellos. Se demostró la actividad antibacteriana in vivo de C. spinosa y puede usarse como una alternativa efectiva para el tratamiento de infecciones de otras bacterias y en otras especies acuícolas, a bajo costo y amigable con el medio ambiente.
Herbal extracts have been widely used in dermocosmetics as a source of biomolecules and also as a natural claim. Fruits from Caesalpinia spinosa show great potential for their polyphenolic content, preservative, and film-forming features, as previously reported in specialized literature; however, the toxicity requires investigation. We explored Oreochromis niloticus (tilapia) in larval, alevins, and juvenile stages to evaluate the ex vivo and in vivo genotoxicity and in vivo acute and chronic toxicity of C. spinosa aqueous extract in different concentrations. Cytotoxicity, animal behavior, morphological deformities, and DNA damage were evaluated. Our results showed genotoxic effect in ex vivo tests, but no DNA damage in in vivo erythrocytes. We suggest a mechanism of cell permeability involved in the toxicity of C. spinosa aqueous extract. Internal validation showed the feasibility of O. niloticus applied for toxicity evaluation. Further studies could contribute for better understanding the uses and safety of C. spinosa in cosmetics and topical pharmaceutical products.
a.PCR en tiempo real para el sexaje y análisis citológico de la sinapsis del bivalente más pequeño en espermatocitos en paquiteno de Oreochromis niloticus Real-time PCR for sexing and cytological analysis of the synapsis of the smallest bivalent in pachytene spermatocytes of Oreochromis niloticus Resumen El objetivo de la presente investigación fue dar a conocer nuevos marcadores moleculares para la PCR en tiempo real asociados a los cromosomas sexuales y el análisis de la sinapsis del bivalente más pequeño en espermatocitos en paquiteno de Oreochromis niloticus. Se diseñaron cuatro pares de cebadores y se pusieron a prueba por PCR punto final y por PCR en tiempo real utilizando el fluorescente SYBR® Green en muestras de ADN de hembras XX, machos XY y supermachos YY. Los tamaños de los fragmentos amplificados por PCR punto final fueron concordantes a los valores esperados y por PCR en tiempo real se demostró igual especificidad pero con ventaja en rapidez en la detección de amplificación de marcadores asociados a los cromosoma X y Y, de acuerdo con las condiciones de la PCR establecidas. Las diferencias genéticas entre las regiones de los cromosomas X y Y demostradas con los marcadores específicos no fueron perceptibles citológicamente en los espermatocitos en paquiteno de O. niloticus XY. En base a las diferencias y homologías de las secuencias de ADN entre las accesiones KC710223 y KC710224 de los cromosomas X y Y se propone un modelo de sinapsis del bivalente XY.Palabras clave: Oreochromis niloticus; tilapia; PCR en tiempo real; determinación del sexo; paquiteno. AbstractThe aim of the present study was to report new molecular markers for real-time PCR associated with X and Y sex chromosomes, and perform analysis of the synapsis of the smallest bivalent in pachytene spermatocytes of XY male Oreochromis niloticus. Four pairs of primers were designed and were tested by endpoint PCR and real-time PCR using SYBR Green detection system in DNA samples from XX females, XY males and YY supermales. In order to assess the smallest bivalent synapsis, testicular samples from XY males were used to make chromosomal spreads in pachytene. Size range of fragments amplified by endpoint PCR was concordant with the expected values. Real-time PCR assay showed equal specificity but speed advantage in amplification detection of markers associated with X and Y chromosomes according to the established PCR conditions. Genetic differences between regions of the X and Y chromosomes (smallest bivalent) proven with specific markers were not cytological perceptible in pachytene spermatocytes from XY O. niloticus. A model of XY bivalent synapse was suggested based on the DNA sequences homologies and differences between KC710223 and KC710224 accessions from X and Y chromosomes.
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