Objetivos: Discutir o conhecimento dos profissionais de saúde de um Ambulatório Escola sobre o uso dos Equipamentos de Proteção Individual (EPI) e descrever como estes profissionais utilizam tais equipamentos na sua prática diária. Métodos: Trata-se de um estudo descritivo, exploratório com abordagem qualitativa, realizada no ambulatório de um Centro Universitário de Teresina-PI. Os dados foram coletados por meio de roteiro de entrevista semiestruturado e analisados posteriormente. Resultados: Emergiram três categorias semânticas: Equipamentos de Proteção Individual: uma maneira mais segura de trabalho; Utilização dos EPIs: uma responsabilidade coletiva e; Utilização seletiva dos EPIs: um conhecimento necessário. Conclusão: A partir deste estudo acredita-se que é fundamental investir no processo de educação permanente e orientação destes profissionais sobre o uso e manuseio correto dos EPIs, eliminando ou minimizando os riscos de contrair infecções hospitalares, sobretudo relacionadas a não utilização de todos os aparatos necessários para a devida proteção.