Perkembangan bioteknologi dalam bidang molekuler memungkinkan untuk mendeteksi keberadaan suatu penyakit lebih awal, lebih cepat dan akurat. Salah satu teknik dalam bioteknologi yang sudah sangat berkembang serta sering dimanfaatkan dalam penelitian biologi dan medis adalah metode PCR. Teknik molekuler ini memungkinan untuk identifikasi secara akurat pada tingkat DNA terhadap keberadaan suatu penyakit tertentu. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan monitoring adanya DNA provirus virus penyakit Jembrana pada sapi bali dari seluruh kabupaten di Bali. Sampel berupa darah sapi bali yang diambil pada tahun 2017 dari seluruh kabupaten yang ada di Bali sebanyak 170 sampel dan pada tahun 2018 dari Kabupaten Buleleng sebanyak 101 sampel dan Kabupaten Karangasem sebanyak 152 sampel. DNA diekstrak menggunakan QIAamp DNA blood mini kit dan sampel tahun 2017 dibuat menjadi 34 pool sampel, sedang sampel tahun 2018 dibuat menjadi 20 pool sampel (Kabupaten Buleleng) dan 30 pool sampel (Kabupaten Karangasem).  PCR dilakukan menggunakan primer JDV 1 dan JDV 3 dalam total reaksi 25 µL dengan 35 siklus. PCR juga dilakukan terhadap kontrol positif dan kontrol negatif. Hasil menunjukkan bahwa ke-34 pool sampel sapi bali yang diambil tahun 2017 maupun 20 pool sampel dan 30 pool sampel dari tahun 2018  tidak menunjukkan adanya DNA provirus virus penyakit Jembrana. Kata kunci: PCR, DNA provirus, Virus Penyakit Jembrana