Neospora caninum is a protozoan parasite closely related to Toxoplasma gondii and has been studied for causing neuromuscular disease in dogs and abortions in cattle. It is recognized as one of the main transmissible causes of reproductive failure in cattle and consequent economic losses to the sector. In that sense, this study aimed to evaluate the role of Toll-like receptor 3 (TLR3)-TRIF-dependent resistance against N. caninum infection in mice. We observed that TLR3 Ϫ/Ϫ and TRIF Ϫ/Ϫ mice presented higher parasite burdens, increased inflammatory lesions, and reduced production of interleukin 12p40 (IL-12p40), tumor necrosis factor (TNF), gamma interferon (IFN-␥), and nitric oxide (NO). Unlike those of T. gondii, N. caninum tachyzoites and RNA recruited TLR3 to the parasitophorous vacuole (PV) and translocated interferon response factor 3 (IRF3) to the nucleus. We also observed that N. caninum upregulated the expression of TRIF in murine macrophages, which in turn upregulated IFN-␣ and IFN-␤ in the presence of the parasite. Furthermore, TRIF Ϫ/Ϫ infected macrophages produced lower levels of IL-12p40, while exogenous IFN-␣ replacement was able to completely restore the production of this key cytokine. Our results show that the TLR3-TRIF signaling pathway enhances resistance against N. caninum infection in mice, since it improves Th1 immune responses that result in controlled parasitism and reduced tissue inflammation, which are hallmarks of the disease.

Neospora caninum poses as a considerable threat to animal health and generates significant economic impact in livestock production worldwide. Here, we have investigated the mechanism that underlies the participation of the inflammasome complex and Reactive Oxygen Species (ROS) in the regulation of immune responses during N. caninum infection. For that purpose, we used in vitro (bone marrow derived macrophages) and in vivo mouse models of infection. Our results show that NLRP3 and NLRC4 receptors, alongside with ASC and Caspase-1, are required for proper activation of the inflammasome during N. caninum infection. As expected, the engagement of these pathways is crucial for IL-1α, IL-1β, and IL-18 production, as well as the induction of pyroptosis. Our results also show that N. caninum induces ROS production dependent of the inflammasome assembly, which in its turn also depends on MyD88/NF-κB-induced ROS to maintain its activation and, ultimately, lead to restriction of parasite replication.

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O ser humano é parte de um todo que chamamos de universo, uma parte limitada no tempo e no espaço. A pessoa experimenta a si mesma, seus pensamentos e sensações como algo separado do restante -trata-se de uma espécie de ilusão de ótica de sua consciência. Essa ilusão nos aprisiona, limitando-nos a nossos desejos individuais e a sentirmos afeto apenas pelas pessoas mais próximas. Nossa tarefa deve ser libertar a nós mesmos dessa prisão, alargando nosso círculo de compaixão para podermos abarcar todos os seres viventes e a natureza inteira."Albert Einstein -citado por Brian Weiss "Nós somos aquilo que fazemos repetidamente.A excelência, portanto, não é um ato, mas um hábito. " Aristóteles Agradecimentos especiaisÀ minha mãe Maria Socorro, à minha mãe biológica Maria Micaela e à minha noiva Marina Medalha, por serem o meu conforto, minha fonte inesgotável de inspiração e o meu tesouro maior. Por me tornarem consciente de que tenho absolutamente tudo de essencial e necessário para uma vida digna e respeitável e que qualquer outra conquista será uma mera adição e jamais pode substituir o amor.A minha irmã Patrícia, por todo o amor, carinho, compreensão e momentos inesquecíveis.Aos meus queridos sogros Veralucia e Kleber e ao meu cunhado Gilberto, por me permitirem fazer parte daquilo que é um exemplo de família, onde se prega o amor, o respeito e a amizade. AgradecimentosAo Dr. Tiago Wilson Patriarca Mineo, por ter me recebido em seu laboratório e ter me oferecido as oportunidades necessárias para a realização desse trabalho, por todo o ensinamento, motivação e orientação.Ao Dr. José Roberto Mineo, por compartilhar da sua vasta experiência e pela orientação.