INTRODUZIONEClostridium difficile (C. difficile) è considerato un patogeno emergente e negli ultimi anni è diventata una causa importante di malattie nosocomiali. C. difficile è un bacillo Gram positivo, anaerobio e sporigeno. È ampiamente presente nel suolo, nell'intestino degli animali e dell'uomo e la presenza delle spore ne favorisce la diffusione. È la principale causa di diarrea in pazienti ospedalizzati o residenti in istituti di lungodegenza con quadri clinici che vanno da diarrea a colite pseudomembranosa e megacolon tossico. La malattia è dovuta alla produzione di enterotossina A, citotossina B o di tossina binaria. I principali fattori di rischio dell'infezione da C. difficile sono il trattamento con antibiotici ad ampio spettro di attività, l'età superiore a 65 anni e l'ospedalizzazione prolungata. Il principale veicolo di diffusione in ambito ospedaliero è ritenuto il personale medico e paramedico con le manovre assistenziali (2, 5). Allo scopo di conoscere la prevalenza delle infezioni da C. difficile nell'ospedale di Prato, abbiamo eseguito una valutazione retrospettiva delle infezioni causate da questo microrganismo nel periodo da gennaio 2010 a dicembre 2011. MATERIALI E METODISono state esaminate le feci di 1197 pazienti ospedalizzati. I campioni vengono esaminati entro 3 ore dall'arrivo in laboratorio e la presenza di ceppi produttori di tossine comunicata immediatamente al reparto. In tutti è stato ricercato l'antigene
Intoduction. The sexually transmitted diseases include a large group of infections affecting both the sexes. In this study we evaluated the prevalence of Trichomonas vaginalis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae and Ureaplasma urealyticum in the Prato area during the period September 2010 -July 2011. Methods. We analysed different kind of samples (urine, endocervical swabs, urethral swabs, seminal fluids) from hospitalized patients or referred to the Prato clinic subjects.The DNA was obtained using EZ1-DNA extraction kit and EZ1 instrument. The DNA was then amplified using the Seeplex STD6 kit (Seegene, Korea), identifying multiple pathogens simultaneously (T. vaginalis, M. hominis, M. genitalium, C. trachomatis, N. gonorrhoeae e U. urealyticum). The revelation was performed by electrophoresis on microchip (instrument Multina, Shimadzu, Japan). Results. 1136 samples from Italian and foreign patients were examined: 876 were endocervical swabs (77%), 103 urethral swabs (9%), 103 seminal fluids (9%), and 54 urines (5%). The number of females was higher than males [894 (78.7%) vs 242 (21.3%)]; the mean age of females was 37.0±11.6 years, whereas that of males was 41.5 ±12.63 years.The prevalence of urogenital pathogens was: 15 positive samples for T. vaginalis (1.3%), 56 for M. hominis (4.9%), 13 for M. genitalium (1.1%), 28 for C. trachomatis (2.5%), 8 for N. gonorrhoeae (0.7%) and 87 for U. urealyticum (7.7%).Among all positive, 25 subjects were positive for more than one pathogen and in particular: one was positive for the presence of 4 pathogens, five presented 3 pathogens simultaneously and the remaining nineteen for 2 pathogens. Conclusions. This study provides data on the prevalence of sexually transmitted diseases in the hospital of Prato.
INTRODUZIONELa spettrometria di massa MALDI-TOF è recentemente entrata a far parte delle metodiche di indagine microbiologica in molti laboratori di batteriologia con indubbi vantaggi sia di natura pratica che economica (1, 2). La sua applicazione nella rapida identificazione di agenti responsabili di sepsi è di importanza strategica poiché può fornire al clinico informazioni utili per la somministrazione di una pronta e rapida terapia antimicrobica empirica "mirata" (3-6). Scopo del presente lavoro è di valutare l'introduzione di questa pratica strumentale nella routine di un laboratorio di batteriologia applicandola alla diagnosi microbiologica delle sepsi. MATERIALI E METODISono state esaminati un totale di 343 flaconi risultati positivi appartenenti a 211 pazienti. I campioni sono stati processati con lo strumento BAC-TEC FX (Becton Dickinson, France) o BactAlert (bioMérieux, France). Da ogni flacone positivo sono stati prelevati con una siringa sterile, 5 ml di brodocoltura che venivano utilizzati per riempire una provetta vacutainer SST II Advance (Becton Dickinson), allestire un vetrino per l'esame microscopico Gram ed inoculare gli idonei terreni solidi agarizzati secondo il protocollo in uso presso il nostro laboratorio. La provetta era quindi centrifugata a 1200g per 15 minuti, le piastre seminate incubate a 37°C per 18/36 ore. Dopo aver eliminato il sovranatante venivano aggiunti alla provetta 2 ml di acqua distillata sterile. La patina batterica eventualmente presente sul gel, già liberata dalla parte corpuscolare del Spettrometria di massa (MALDI-TOF) applicata alla identificazione rapida di agenti eziologici responsabili di sepsi SUMMARY Introduction: The MALDI-TOF has recently become part of the methods of microbiological investigation in many laboratories of bacteriology with advantages both practical and economical.The use of this technique for the rapid identification of the causative agents of sepsis is of strategic importance to the ability to provide the clinician with useful information for a prompt and rapid establishment of an empirical antimicrobial "targeted" therapy. Methods: It was tested a total of 343 positive blood culture bottles from 211 patients. The samples after collection were incubated in the BACTEC FX (Becton Dickinson, USA). From these bottles were taken a few milliliters of broth culture and transferred into a vacutainer tube containing gel. This was centrifuged, the supernatant was decanted, and finally recovered the bacterial suspension on the gel. With micro-organisms recovered in this way, after several washes with distilled water, was prepared a slide for microscopic examination with Gram stain, and a plate for mass spectrometry (MS-Vitek, bioMérieux, France).Then, the same samples were inoculated on solid agar media according to the protocol in use in our laboratory.The next day was checked the possible bacterial growth on solid media; we then proceeded to the identification of the colonies by Vitek MS and / or with the system Vitek2 (bioMérieux, France). Results: 2...
In this study, the prevalence of <em>Ureaplasma</em> <em>parvum</em> in the area of Prato (Italy) was investigated. Samples from 1197 consecutive patients were analyzed. Our results showed that the prevalence of <em>U</em>. <em>parvum</em> was 33.6%, with a higher percentage in females than in males (40.6% <em>vs</em> 9%). In addition, the prevalence of <em>U</em>. <em>parvum</em> was significantly lower in older patients.
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