RESUMO A alface (Lactuca sativa L.) é uma hortaliça folhosa amplamente cultivada, em grande maioria por pequenos agricultores, sendo que a produção de mudas de qualidade é essencial para um bom desenvolvimento da cultura. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar tipos de bandejas e diferentes cultivares na formação das mudas de alface. O experimento foi conduzido em viveiro telado no Campus experimental da Universidade Federal de Rondônia (UNIR), localizado no município de Rolim de Moura-RO. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados, em esquema fatorial 4x2, com quatro repetições, onde foram avaliadas quatro cultivares de alface sendo elas: 1-Alface americana Grandes Lagos 659 (A.G.L.659); 2-Alface Mimosa Green Salad Bowl (A.M.G. Bowl); 3-Cultivar Regina (C. Regina); 4-Alface Crespa hortencia (A.C Hortencia). Submetidas a dois tipos de bandejas de poliestireno expandido (Isopor ®) de 128 células, (25,09 cm 3 ; 3,7x5,5cm) e 200 células (12,39 cm 3 ; 2,6x5,5 cm). As variáveis analisadas foram altura da planta (ALT); número de folhas (Nº F); massa fresca da parte aérea (MFPA); massa fresca da raiz (MFR); comprimento da raiz (C.Raiz). Dentre as cultivares estudas a que apresentou um elevado desempenho na formação das mudas foi a cultivar Regina, já a cultivar Grandes lagos 659 obteve as menores médias. A bandeja de poliestireno de 128 células apresentou um ganho elevado nas variáveis massa fresca da raiz e comprimento da raiz, fatores importantes para um bom desenvolvimento em campo.