Summary Liposomes were prepared in the presence of plasmid DNA and allowed to react with spermatozoa from roosters prior to artificial insemination of 200 hens. Twelve days old fetuses developed from fertilized eggs were analysed by Southern blot technique to detect the transfer of the foreign sequences. About 26% of all fetuses examined displayed the banding pattern of the transferred plasmid. The results indicate that the sequences are not chromosomally integrated but are present in episomic form. The method described here is easy to handle so that it may become an appropriate means to establish large numbers of transgenic animals. Zusammenfassung Liposomaler Gentransfer über Spermien in Hühnereier Mischsperma von mehreren Hähnen wurde mit Liposomen inkubiert, in denen Plasmid‐DNA eingeschlossen war. Mit diesem Sperma sind 200 Hennen inseminiert worden. Nach 12 Tagen Bebrütung wurden die Föten mittels Southernblot‐Technik analysiert. Rund 26% aller untersuchten Föten zeigten die typischen Bandenmuster des transferierten Plasmids. Die Befunde weisen darauf hin, daß das Plasmid nicht chromosomal integriert, sondern als Episom neben der genomischen DNA vorliegt. Das hier beschriebene Gentransfer‐Verfahren ist einfach zu handhaben, so daß ohne nennenswerten Aufwand größere Zahlen transgener Tiere erstellt werden können.

Summary Plasmid DNA was encapsulated in liposomes to protect from degradation and to support the incorporation into sperm cells. Transgenic spermatozoa carry the foreign DNA to the target cell when fertilizing the egg. Several plasmid constructs were transferred into rabbits, cattle and chicken. The plasmid apparently can persist when provided with a murine amplification promoting sequence. The transgeneity of sperm cells as well as fetuses or offspring was demonstrated by dot blot, Southern blot analysis and PCR. Expression of the transgene was shown as enzymatic activities of the reporter genes SEAP or β‐galactosidase and by gelelectrophoretic characterization of the expressed gene products. The transfer efficiency and the persistence of the gene constructs is significantly increased due to the use of sperm cells as gene carriers mediated by liposomes and the amplification element. Zusammenfassung Gentransfer mittels Liposomen und Spermien Plasmid‐DNA wurde in Liposomen eingeschlossen, um sie vor enzymatischem Abbau zu schützen und ihre Inkorporation in die Spermienzelle zu ermöglichen. Bei der Befruchtung bringt das Spermium die Fremd‐DNA in die Eizelle. Es wurden verschiedene Genkonstrukte in Kaninchen, Rind und Huhn übertragen. Das Plasmid kann offensichtlich persistieren, wenn es eine murine amplifikationsfördernde Sequenz enthält. Die Transgenität von Spermien, Feten und Nachkommen wurde mit Dot Blot, Southern Blot und PCR nachgewiesen, die Expression der Reportergene SEAP und β‐Galaktosidase gelelektrophoretisch bzw. enzymatisch charakterisiert. Der Einsatz von Spermien und Liposomen zur Genübertragung sowie die Verwendung einer ‘amplification promoting sequence' erhöhen die Transfereffizienz und die Persistenz der Genkonstrukte beträchtlich.