Lippia graveolens u orégano mexicano, es una planta de importancia económica y la recolección del follaje se realiza principalmente de poblaciones naturales. La micropropagación propone una alternativa para la producción de material, con alta calidad fitosanitaria y propagación en menor tiempo de individuos seleccionados por sus características de valor comercial. El objetivo de este trabajo fue establecer un protocolo para la propagación in vitro de Lippia graveolens. La investigación se realizó en el año 2018-2019. El establecimiento se logró con segmentos nodales en medio basal MS, en esta etapa se recuperó 57.32% de explantes axénicos. Para la etapa de propagación se adicionó al medio MS cuatro concentraciones (0, 1, 2 y 3 mg L-1) de bencilaminopurina (6-BAP), se evaluó número de brotes y altura de plántula, los mejores resultados en la multiplicación se lograron con 3 mg L-1 de 6-BAP, obteniéndose 40.35 brotes por explante. La longitud de brote fue mayor en los tratamientos sin reguladores de crecimiento. Para el enraizamiento, se ensayó con tres concentraciones (0, 0.1, 0.3 y 0.5 mg L-1) de auxinas (ácido indol acético y ácido indol butírico) y se evaluó el porcentaje de enraizamiento y la longitud de la raíz obteniéndose igual resultado con y sin reguladores auxínicos. En la fase de aclimatación se evaluó el fotoperiodo (16 h y 24 h) con y sin micorrizas (Glomus intraradicens). El mejor tratamiento se obtuvo con 24 h luz y con adición de micorrizas con un 86.11% de supervivencia.