A alface (Lactuca sativa) é originada de espécies silvestres de regiões de clima temperado do sul da Europa e na Ásia Ocidental A temperatura adequada para germinação das sementes de alface está em torno de 20ºC, e a maioria das cultivares não germina em temperaturas superiores a 30ºC. O objetivo deste trabalho foi avaliar a porcentagem de germinação e índice de velocidade de germinação de alface em diferentes substratos. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado (DIC) com seis tratamentos e dez repetições, totalizando 60 unidades experimentais, e os tratamentos foram: 1) papel mata-borrão (2,02 g), 2) areia autoclavada (500 g), 3) solo latossolo vermelho-claro autoclavado (500 g), 4) vermiculita (500 g), 5) mistura de areia com vermiculita (500 g), 6) mistura de latossolo vermelho-claro autoclavado com vermiculita (500 g). Os tratamentos foram significativos (P ≤0,05), e merecem destaque o papel mata-borrão (T1) com 90,8 % de germinação (G), 0,91 índice de velocidade de germinação (IVG) e peso de raiz (PR) 14,48 g, areia autoclavada (T2) que apresentou 86% (G), 0,86 (IVG) e 13,81 g (PR),  areia com vermiculita (84% de G, 0,84 de IVG e 13,34 g de PR) e vermiculita (70% de G, 0,7 de IVG e 11,92 g de PR) das sementes de alface, e os menores valores latossolo vermelho-claro autoclavado com vermiculita (30% de G e 0,30 de IVG) e  latossolo vermelho-claro autoclavado (28% de G e 0,28 de IVG). Conclui-se que o papel mata-borrão apresenta melhor germinação do que os demais tratamentos, porém, os substratos areia, vermiculita e a mistura areia e vermiculita apresentam um grande potencial para ser utilizado na produção de mudas de alface.