SUMMARYNorleucine''-substance P and 4-chlorophenylalanine 7;8-Norleucine 11 -. .substance P were synthesized by fragment condensation. Phel H/7*8-norleuc 7 r i e l l -substance P was obtained by catalytic tritiation of the precursor geptide with a specific radioactivity of 27 Cilmole and full biological activity.Recently we reported the tritium labelling of the modified 3 * partial sequence of substance P, acetyl-Lys-Phel HI-Phe-Gly-Leu-NleNH2, by catalytic tritiation of the corresponding synthetic Cpa-containing precursor peptide 111. The labelled peptide was purified using preparative paper electrophoresis and possessed a specific radioactivity of 23 Ci/mmole 111 -a surprisingly high labelling rate for the tritiation of a 4-chlorophenylalanine peptide. The labelled compound had high biological activity in vivo but in receptor studies no specific binding

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Fur die Synthese von Phosphorsaure-o-phenylenester-chlorid bzw. -bromid (2a bzw. 2b) wird ein neues Verfahren beschrieben. 2a laRt sich in die zugrundeliegende Slure, den Phosphorslure-o-phenylenester (5) uberfuhren, dessen Struktur u. a. durch Reaktion mit Diazoverbindungen gesichert wird. -Weiterhin wird das Verhalten von 2a gegenuber k h e r n , Acetalen und Estern beschrieben. Die aus 2a und Carbonsauren bzw. Dimethylformamid erhaltlichen gemischten Anhydride bzw. Saureamidkornplexe sind zur Ubertrdgung von Acylresten geeignet. Im Rahmen systematischer Untersuchungen uber o-Phenylendioxy-phosphortrichlorid (1 a) (,,Brenzcatechylphosphortrichlorid") und -tribromid (1 b) fandenwir, da8Verbindungen dieses Typs gut geeignet sind, Halogen auf 0-funktionelle Verbindungen zu iibertragenl). In diesem Zusammenhang wurde die Frage nach der Reaktionsfahigkeit der Phosphorsaure-o-phenylenester-halogenide (,,Brenzcatechylphosphoroxyhalogenide") 2a und 2b aufgeworfen. Die vorliegende Mitteilung berichtet iiber Synthesen und Reaktionen dieses Verbindungstyps und der zugrundeliegenden freien Saure, des Phosphorsaure-o-phenylenesters 5 (,,Brenzcatechylmonohydrogenphosphat"). A. Darstellung der Phosphorsaure-o-phenylenester-halogenide (2)Bei partieller Hydrolyse oder bei Umsetzung von o-Phenylendioxy-phosphortrichlorid (1 a) mit verschiedenen 0-funktionellen Verbindungen, z. B. mit Carbonsauren oder Aceton, war schon friiher1.2) in guten Ausbeuten 2a erhalten worden. R-CO2H-HX, -RCOX la: x = c1 lb: X = Br 2a: x = c1 2b: X = B r 1) I.

The degradation of substance P (an undecapeptide with the following structure: Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2) by the post-proline cleaving enzyme (EC 3.4.21.-) was investigated. The peptide bond between proline and glutamine in positions 4 and 5 of substance P was hydrolyzed in the presence of the enzyme. The tetrapeptide Z-Gly-Pro-Leu-Gly-NH2 was synthesized and used for determining the enzyme activity during the purification procedure.

Phosphorsäure‐o‐phenylenester 2 ist in reiner Form durch vorsichtige Solvolyse von Phosphorsäure‐o‐phenylenesterchlorid 1, zugänglich bisher bekannte Verfahren liefern nur uneinheitliche Produkte. Das Anhydrid von 2, Pyrophosphorsäure‐bis‐o‐phenylenester 8, wurde auf mehreren unabhängigen Wegen synthetisiert. Aus 1 und Hexamethyldisiloxan ist der Trimethylsilylester von 2, 9b, zugänglich. — Halogenierung des Pyrophosphorigsäure‐bis‐o‐phenylenesters 10 führte unter Spaltung der Anhydrid‐Bindung zu den entsprechenden Säurehalogeniden.