Introdução: A profilaxia cirúrgica com a lavagem das mãos é algo bastante consolidado na comunidade acadêmica e médica, tendo em vista as suas consequências benéficas na prevenção da contaminação por microrganismos. Dessa forma, o presente trabalho tem como objetivo discutir sobre a importância da lavagem de mãos no sítio cirúrgico, demonstrando os aspectos microbiológicos e contribuindo para o conhecimento acerca dos antissépticos da microbiota normal e transitória. Método: Trata-se de uma pesquisa de revisão bibliográfica, realizada online na Biblioteca Virtual em Saúde, sendo utilizada a Bases de Dados LILACS e SCIELO, para construção do estudo. Resultados: Foram analisados e comprovados através da pesquisa bibliográfica que a lavagem de mãos como profilaxia no ambiente cirúrgico é umas das maneiras mais eficazes nessa atuação. Além do mais, os antissépticos mais utilizados são, sucessivamente: solução alcoólica (exceto álcool 70%), clorexidina 2%, iodóforos, solução contendo peróxido de hidrogênio, glicerol, iodo e o triclosan que são descritos em suas especificidades microbiológicas. Conclusões: Depreende, portanto que mediante a análise aponta-se que nenhum dado impõe certa substância como absoluta na realização da assepsia cirúrgica das mãos no pré-operatório, todavia o método que se mostrou mais eficiente por proporcionar um ambiente mais seguro e apto ao paciente cirúrgico, foi com o uso de soluções antissépticas alcoólicas já que o mecanismo de ação desses antissépticos está atrelado a sua propriedade bactericida de desnaturar as proteínas que entram em contato com o produto, além de possuírem excelente atividade germicida in vitro contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas incluindo as multirresistentes.