Die Hyaluronatlyase wurde als ein Enzym erkannt, das Hyaluronsäure zu einem ungesättigten Disaccharid 3-0-[/?-D-Zl 4<5 -Glucoseen-pyranosyl-uronsäure]-2-acetamido-2-desoxy-D-glucose abbaut 1 . Bisher wurde Hyaluronatlyase nur in Bakterien -wie Streptokokken, Staphylokokken und Clostridium welchii -gefunden, von denen sie in der Wachstumsphase gebildet wird 2 . Im Gegensatz zur Hyaluronidase, die bislang nur aus den Testes isoliert wurde, ist die Hyaluronatlyase keine Hydrolase.In der vorliegenden Arbeit berichten wir über die Auftrennung verschiedener Hyaluronatlyase-Präparate in Isoenzyme und deren kinetisches Verhalten. Methodik Enzyme: 1. Hyaluronatlyase aus Staphylococcus aureus (Darstellung nach 1. c. 3 ). 2. Hyaluronatlyase aus Streptokokken. Die Isoenzymdarstellung erfolgte durch Fraktionierung an einer DEAE-Cellulose-Säule, deren Entwicklung diskontinuierlich mit folgenden Elutionsmitteln vorgenommen wurde:1. 25 ml 0,005m Phosphatpuffer, pH 7 2. 25 ml 0,01m Phosphatpuffer, pH 6 3. 25 m? 0,02m Phosphatpuffer, pH 6 4. 75 ml 0,05m NaH 2 P0 4 5. 90 ml 0,05m-NaH 0 P0 4 in 0,02w NaCl 6. 130 ml 0,05m NaHgPC^ in 0,05rc NaCl 7. 210 ml 0,05m NaH 2 P0 4 in 0,lw NaCl. Die Eluate mit den Hauptfraktionen wurden gegen Wasser dialysiert und anschließend gefriergetrocknet.Die Aktivitäten wurden mit dem optischen Hyaluronatlyase-Test im Eluat nach der DEAE-Säulenchromatographie gemessen. Als eine Hyaluronatlyase-Einheit bezeichnen wir die Enzymmenge, die bei 30°, 230 m und in 100 Sek. die Extinktion um 0,1 erhöht (bezogen auf l ml und die 10-mm-Küvette) 4 . * Der Name Hyaluronatlyase (EG 4.2.99.1) soll nur für das Enzym verwendet werden, welches Hyaluronsäure in einer Eliminierungsreaktion zu ungesättigten Uroniden spaltet; der Name Hyaluronidase (systemat. Name: Hyaluronat-Glycanohydrolase, EC 3.2.1.35/36) ist für die hydrolytischen Enzyme (Hauptvorkommen: Testes) vorbehalten, die keine Doppelbindungen bilden. 1
