Plant DNA and RNA extraction methods are well established, with a wide range of protocols, depending on the purposes of each laboratory/research. Nowadays, quick, inexpensive and easy plant DNA and RNA extraction methods are highly sought after. We developed an optimized protocol for plant DNA and RNA extraction that uses an inexpensive bench drill and plastic bags and does not require liquid nitrogen. DNA from leaves and RNA from leaves and roots of banana, pineapple, citrus, papaya, passion fruit and cassava, were extracted using a basic cetyltrimethylammonium bromide method. Both nucleic acids were quantified and evaluated for quality based on agarose gel electrophoresis. The DNA and RNA extractions were successful for all species, and RNA quality in pellets was maintained after storage at room temperature for three weeks. This protocol can reduce costs considerably in laboratories with ongoing routine activities of DNA and ©FUNPEC-RP www.funpecrp.com.br Genetics and Molecular Research 18 (3): gmr18394 C.F. Ferreira et al. 2RNA extraction for genetic diversity and gene expression analyses, where other conventional methods have not been successful due to explant, condition of samples and quantity and quality of nucleic acids. This is especially relevant for many laboratories in developing countries where the cost and availability of liquid nitrogen may be a constraint.
Introdução: A parede celular (PC) é um envoltório extracelular presente em todos os vegetais e fungos e em algumas bactérias e algas. De acordo com os processos evolutivos dos organismos sua composição química sofre variações, por exemplo, o principal constituinte da PC dos fungos é a quitina, das algas a celulose e das bactérias peptidoglicano. Se tratando da parede celular vegetal, a mesma é constituída por macromoléculas heterogêneas, celulose, hemicelulose, pectina e lignina, além de proteínas fundamentais no processo de remodelamento da estrutura. Objetivo: Estabelecer um novo olhar para parede celular vegetal que vai além da proteção. Revisão e resultados: A PC é uma estrutura flexível e dinâmica de maneira a se remodelar quando a planta é submetida a estresse abiótico ou biótico. Um estudo comparativo dos efeitos de fatores de estresse abióticos (seca, inundações, calor, frio, salinidade, metais, irradiância de luz e poluentes do ar) sobre o metabolismo da PC primária e secundária, demonstrou que frente a estresses ocorre na PC primária um aumento significativo no nível de xiloglucano endotransglycosylases e expansina. Na secundária, ocorre o aumento do espessamento devido ao acúmulo de hemicelulose e lignina. Em conjunto, os resultados indicam que proteínas que compõem a PC são as principais responsáveis pelo remodelamento da mesma. A PC é também um importante alvo biotecnológico, uma vez que é a principal contribuinte para a formação da biomassa utilizada na produção de biodiesel. Portanto, sua modificação físico-química pode reverter no aumento da produtividade da cultura. Trabalho relata a modificação da PC de Arabidopsis thaliana, via transgenia, orientando os domínios de ligação do amido sintetase III para essa estrutura. As plantas transgênicas obtidas mostraram um aumento de biomassa, níveis mais elevados de açúcares fermentáveis e celulose hidrolisada e alteraram as propriedades da PC, como maior frouxidão e degradabilidade, que são características importantes para a indústria de biocombustíveis de segunda geração. Conclusão: Diante do exposto, demonstra-se que a parede celular é uma estrutura complexa e caracterizar sua composição é necessário para desvendar algumas das bases moleculares de resistência a processos de estresse biótico e abiótico bem como no incremento dos usos biotecnológicos da mesma.
Introdução: Carpotroche brasiliensis Raddi é uma árvore da família Achariaceae, nativa da Mata Atlântica, presente nos estados da Bahia, Minas Gerais, Espírito Santo e Rio de Janeiro. É popularmente conhecida como fruto de paca, fruto de macaco, fruto de cotia ou sapucainha. Destaca-se por possuir sementes ricas em lipídios em seus frutos nutritivos, presentes em sistemas agroflorestais do tipo “cabruca”. Na região sul da Bahia, ocorre uma grande disponibilidade natural de indivíduos, e a espécie possui valor agregado, o que promove a compra de toda a produção das cooperativas de pequenos agricultores rurais, que atuam em situação de agricultura familiar, por grandes indústrias nacionais do setor de cosméticos. Objetivos: Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo realizar um levantamento bibliográfico das principais aplicações indústriais e biotecnológicas da espécie Carpotroche brasiliensis. Para a realização deste trabalho foram utilizadas as metodologias exploratória e descritiva. Material e Métodos: O estudo consistiu no levantamento de informações divulgadas em documentos técnicos e artigos científicos. Resultados: O óleo extraído das sementes da sapucainha, conhecido como óleo de chaulmugra possui função inseticida, parasiticida, e foi bastante utilizado como medicamento antileprótico. Atualmente, além do uso como fármaco, é utilizado como matéria prima na confecção de cosméticos por empresas nacionais. O óleo apresentou atividade antiproliferativa com linhagens cultivadas “in vitro” de células tumorais, necessitando estudos adicionais para validar a atividade antitumoral. Conclusão: O que reforça a importância do presente estudo, fornecendo informações básicas para aplicações biotecnológicas futuras da espécie em questão, tanto para a indústria de produtos antienvelhecimento, quanto para o tratamento de tumores.
Introdução: Originária da China a soja (Glycine max) está entre as principais espécies cultivadas no Brasil atualmente, representando uma importante contribuição para a economia do país. No entanto, alguns fatores abiótico e bióticos vem causando limitações e prejuízos ao cultivo de soja no brasil e países produtores. Dentre estes podemos destacar a ocorrência de doenças causadas por vírus e fungos, como a ferrugem asiática, mofo branco, mosaico comum da soja entre outras. A variação dos patógenos faz com que a busca por resistência seja constante e as ferramentas de biotecnologia podem ser uma importante aliada neste processo, dentre elas a superexpressão de genes associados a resistência pode representar uma estratégia promissora. Objetivo: A presente revisão bibliográfica visa reunir os principais avanços e contribuições da superexpressão de genes para aumento de resistência a doenças em soja. Material e métodos: Foram realizadas buscas de artigos científicos na literatura, sendo as pesquisas realizadas no Google scholar. Os artigos foram buscados usando termos de busca associadas a conectores booleanos. Foi feita a leitura dos artigos que apresentaram os termos de busca no título e resumo. Resultados: Com base nos artigos analisados observou-se que a superexpressão de genes em soja foram conduzidas visando resistência a diferentes patógenos como Sclerotinia sclerotiorum e vírus do mosaico da soja (VMS). No entanto, a maioria dos artigos adotaram esta ferramenta para obtenção de resistência ao VMS. Os níveis de expressão gênica nas plantas transgênicas foram avaliadas por PCR em tempo real e nos trabalhos analisados todas as plantas transgênicas que superexpressaram genes associados a resistência aos patógenos estudados apresentaram ausência de sintomas ou sintomas mais leves, indicando aumento nos níveis de resistência. Além disso, a superexpressão de genes possibilitou testar e identificar genes promissores para resistência a diferentes doenças na soja. Conclusão: A superexpressão de genes associados a resistência a doenças na soja tem trazido grandes avanços para os programas de melhoramento da cultura, se mostrando uma estratégia eficaz para obtenção de genótipos de soja mais resistentes a patógenos como vírus e fungos.
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