ResumoEnzimas proteolíticas constituem um dos mais importantes grupos catalisadores, tem ampla utilização comercial e industrial. Entre essas, as proteases de origem fúngica apresentam vantagens como alta diversidade, fácil produção em larga escala e recuperação. O objetivo deste estudo foi avaliar a produção e caracterizar parcialmente proteases do extrato bruto de Pleurotus ostreatoroseus cultivado em substratos agroindustriais. A cultura matriz foi preparada em ágar batata dextrose acrescida de extrato de levedura 0,5% (p/v). A produção das enzimas proteolíticas foi realizada por fermentação semi-sólida utilizando substratos agroindustriais. A fermentação foi conduzida durante 15 dias sob duas condições de cultivo (presença e ausência de luz). Para determinação da atividade e caracterização parcial das proteases, o extrato bruto foi filtrado sucessivamente em tecido de algodão e membrana polietersulfônica de 0,22 µm. Os resultados demonstraram que os resíduos foram fontes para a produção de proteases com pH variando de levemente ácido a alcalino e temperatura ótima a 25˚C e 40˚C.Palavras-chave: Pleurotus ostreatoroseus; fermentação em estado sólido; enzimas. IntroduçãoNo mercado mundial de enzimas as proteases predominam na indústria de detergentes, farmacêutica, cerveja, couro, alimentos, como coagulante na fabricação de queijo e para recuperação da prata usada no filme de raios-X (GENÇKAL, 2004;CUI et al., 2007;SABOTIC et al., 2007;DABOOR et al., 2010). Proteases também participam da síntese e degradação de proteínas, da conidiogênese e descarga conidial, germinação, modificação enzimática, nutrição e regulação da expressão gênica (CUI et al., 2007;NAKAMURA et al., 2011;ZHENG et al., 2011).As enzimas proteolíticas têm origem de diversas fontes vegetal, animal e microorganismos procariontes e eucariontes, entre estes, os fungos são produtores eficientes, predominando espécies de Aspergillus e Penicillium (SANDHYA et al., 2005). Entre os fungos, os cogumelos estão se tornando uma fonte atraente de compostos bioativos, além de usado tipicamente como alimento. Nos últimos anos, diversos cogumelos comestíveis são também citados como fontes de enzimas, incluindo proteases fibrinolíticas, a exemplo de P. eryngii (CHA et al.Os substratos agroindustriais (casca de cupuaçu, semente de açaí e serragem) e os respectivos suplementos (farelo de arroz, coroa e casca de abacaxi) se mostraram como potenciais substratos em fermentação semi-sólida para produção de enzimas proteolíticas por P. ostreatoroseus. No entanto, nos cultivos mantidos sob luz, casca de cupuaçu e farelo de arroz foi a mistura de substrato mais eficiente para produção das proteases, com atividade ótima em pH 6,0 e a 40 o C, características permitem a aplicação na indústria farmacêutica, têxtil, alimentícia e química. AgradecimentosAo Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), a Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior-CAPES, a Universidade Federal do Amazonas-UFAM pelo apoio financeiro e a todas as pessoas que...

The vertical mycelial growth to investigate the feasibility of Pleurotus ostreatoroseus DPUA 1720 production in lignocellulosic Amazonic residues was evaluated. Mycelial development was carried out in cupuaçu exocarp (Theobroma grandiflorum Willd Former Spreng Schum), açai seed (Euterpe oleracea) and sawdust as substrates. Each residue was supplemented with rice bran, crown and pineapple peel. The average speed of mycelial growth was determined using three replicates for 15 days at 25°C in the absence and presence of light and mycelial vigor and density were evaluated. Five replicates of the selected substrate were used in mushroom production. Vigorous mycelium and strongly dense growth were observed in cupuaçu exocarp treatment supplemented with rice bran. The biological efficiency, production rate and productivity were 22.90, 54.33 and 3.55%, respectively in this substrate. The basidiomata showed low levels of minerals and fat and can be considered as a source of protein (23.53%) and fiber (12.79%).

Mushroom production is a very efficient alternative to agro-industrial residues recycling. The proximal composition, content of macro and micro minerals, amino acid and proteolytic activity were assessed in the pineapple peel and in the bioproducts generated from pineapple peel and mycelium of Pleurotus albidus, Lentinus citrinus and Pleurotus florida. The bioproducts were obtained by semi-solid fermentation and drying process. Nutritional analysis was performed following standard methodologies. The data showed that the percentage of protein and minerals of the bioproducts increased and the carbohydrate content reduced after the myceliation by the mushrooms. All essential amino acids were found in the bioproducts and no contamination was observed. There was significant difference between proteolytic activities of bioproducts samples, presenting L. citrinus' bioproduct a higher value. These data show that the bioproducts produced have great nutritional value and can be used as an alternative food.

The Amazon region is home to a vast microbial diversity that is attracting great interest in the industrial sector, like the anamorphic fungi that has economic value because of the production of bioactive compounds for industrial application. The aim of this study was to isolate and identify fungi from healthy leaf structure of Morinda citrifolia and verify the production of enzymes, as well as characterizing proteases from Aspergillus and Penicillium for industrial application. For the determination of enzyme activities, the fungi were grown in liquid medium (extract MGYP) at 30°C and 150 rpm. After five days, the crude extract was recovered by membrane filtration (22μm) and activity was determined by the cup plate, at 37°C for 18 hours on solid medium with substrate for each enzyme. For visualization of the areas of substrate degradation on the surface of the medium were added solution of Congo Red and 1M NaCl solution to detect cellulase and iodine vapors for detecting amylase. All statements expressed enzyme (amylase, cellulase and protease), but increased expression of the halo was Aspergillus N42 and N34 (cellulases). The protease activity of Aspergillus ranged from 1.36 U/mL (N44) at 3.38 U/ml (N35), whilst for Penicillium N23 values were higher (10.82 U/mL). As to pH, the best results were obtained in a range of 6-9. All isolates tested can be sources of enzymes for future applications in industrial processes. rEsumoA região Amazônica abriga uma vasta diversidade microbiana que vem despertando grande interesse no setor industrial, a exemplo dos fungos anamórficos, que tem valor econômico em virtude da produção de compostos bioativos para aplicação industrial. O objetivo desse estudo foi isolar e identificar fungos da estrutura foliar sadia de Morinda citrifolia e verificar a produção de enzimas, assim como caracterizar proteases de Aspergillus e Penicillium para aplicação industrial. Para a determinação das atividades enzimáticas, os fungos foram cultivados em meio líquido (extrato MGYP), a 30°C e 150 rpm. Após cinco dias, o extrato bruto foi recuperado por filtração em membrana (22µm) e a atividade foi determinada pelo método cup plate, a 37°C por 18 horas em meio sólido adicionado de substrato indutor para cada enzima. Para visualização das áreas de degradação do substrato, na superfície do meio foram adicionadas solução de Vermelho Congo e, solução de NaCl 1M para detectar celulase e vapores de iodo para detectar amilase. Todos os extratos expressaram atividade enzimática (amilases, celulases e proteases), porém o halo de maior diâmetro foi de Aspergillus N42 e N34 (celulases). A atividade das proteases das linhagens de Aspergillus variou de 1,36 U/mL (N44) a 3,38 U/mL (N35), enquanto para Penicillium N23 os valores foram superiores (10,82 U/mL). Quanto ao pH, os melhores resultados foram obtidos numa faixa de 6-9. Todos os isolados testados podem ser fontes de enzimas para futuras aplicações em processos industriais.Palavras-chave: deuteromicetos, bioprocessos, enzimas hidrolíticas

The Amazon region is home to a vast microbial diversity that is attracting great interest in the industrial sector, like the anamorphic fungi that has economic value because of the production of bioactive compounds for industrial application. The aim of this study was to isolate and identify fungi from healthy leaf structure of Morinda citrifolia and verify the production of enzymes, as well as characterizing proteases from Aspergillus and Penicillium for industrial application. For the determination of enzyme activities, the fungi were grown in liquid medium (extract MGYP) at 30°C and 150 rpm. After five days, the crude extract was recovered by membrane filtration (22μm) and activity was determined by the cup plate, at 37°C for 18 hours on solid medium with substrate for each enzyme. For visualization of the areas of substrate degradation on the surface of the medium were added solution of Congo Red and 1M NaCl solution to detect cellulase and iodine vapors for detecting amylase. All statements expressed enzyme (amylase, cellulase and protease), but increased expression of the halo was Aspergillus N42 and N34 (cellulases). The protease activity of Aspergillus ranged from 1.36 U/mL (N44) at 3.38 U/ml (N35), whilst for Penicillium N23 values were higher (10.82 U/mL). As to pH, the best results were obtained in a range of 6-9. All isolates tested can be sources of enzymes for future applications in industrial processes. rEsumoA região Amazônica abriga uma vasta diversidade microbiana que vem despertando grande interesse no setor industrial, a exemplo dos fungos anamórficos, que tem valor econômico em virtude da produção de compostos bioativos para aplicação industrial. O objetivo desse estudo foi isolar e identificar fungos da estrutura foliar sadia de Morinda citrifolia e verificar a produção de enzimas, assim como caracterizar proteases de Aspergillus e Penicillium para aplicação industrial. Para a determinação das atividades enzimáticas, os fungos foram cultivados em meio líquido (extrato MGYP), a 30°C e 150 rpm. Após cinco dias, o extrato bruto foi recuperado por filtração em membrana (22µm) e a atividade foi determinada pelo método cup plate, a 37°C por 18 horas em meio sólido adicionado de substrato indutor para cada enzima. Para visualização das áreas de degradação do substrato, na superfície do meio foram adicionadas solução de Vermelho Congo e, solução de NaCl 1M para detectar celulase e vapores de iodo para detectar amilase. Todos os extratos expressaram atividade enzimática (amilases, celulases e proteases), porém o halo de maior diâmetro foi de Aspergillus N42 e N34 (celulases). A atividade das proteases das linhagens de Aspergillus variou de 1,36 U/mL (N44) a 3,38 U/mL (N35), enquanto para Penicillium N23 os valores foram superiores (10,82 U/mL). Quanto ao pH, os melhores resultados foram obtidos numa faixa de 6-9. Todos os isolados testados podem ser fontes de enzimas para futuras aplicações em processos industriais.Palavras-chave: deuteromicetos, bioprocessos, enzimas hidrolíticas