-The objective of this work was to evaluate in vitro storage of Piper aduncum and P. hispidinervum under slow-growth conditions. Shoots were stored at low temperatures (10, 20 and 25°C), and the culture medium was supplemented with osmotic agents (sucrose and mannitol -at 1, 2 and 3%) and abiscisic acid -ABA (0, 0.5, 1.0, 2.0 and 3.0 mg L -1 ). After six-months of storage, shoots were evaluated for survival and regrowth. Low temperature at 20 o C was effective for the in vitro conservation of P. aduncum and P. hispidinervum shoots. In vitro cultures maintained at 20 o C on MS medium showed 100% survival with slow-growth shoots. The presence of mannitol or ABA, in the culture medium, negatively affected shoot growth, which is evidenced by the low rate of recovered shoots.Index terms: ex situ conservation, germplasm bank, micropropagation. Conservação in vitro dePiper aduncum e Piper hispidinervum sob condições de crescimento lento Resumo -O objetivo deste trabalho foi avaliar a conservação in vitro dePiper aduncum e P. hispidinervum, em condições de crescimento lento. Os brotos foram armazenados a baixas temperaturas (10, 20 e 25ºC), e o meio de cultura foi suplementado com agentes osmóticos (sucrose e manitol -a 1, 2 e 3%) e ácido abcísico -ABA (0, 0,5, 1,0, 2,0 e 3,0 mg L -1 ). Após seis meses de armazenamentos os brotos foram avaliados quanto à sobrevivência e à rebrotação. A baixa temperatura de 20 o C foi efetiva para a conservação in vitro de brotos de P. aduncum e P. hispidinervum. Culturas in vitro, mantidas a 20 o C em meio MS apresentaram 100% de sobrevivência com o crescimento lento dos brotos. A presença de manitol ou ABA, no meio de cultura, afetou negativamente o crescimento de brotos, o que foi evidenciado pelo baixo índice de sobrevivência dos brotos.Termos para indexação: conservação ex situ, banco do germoplasma, micropropagação.
A sacaca é uma planta medicinal do bioma Amazônico e tem sido considerada como substituta do pau-rosa (Aniba rosaeodora) na produção de linalol. Este trabalho objetivou avaliar a propagação vegetativa in vitro de sacaca, incluindo o estabelecimento de propágulos do campo, protocolos de descontaminação e a determinação de taxas de multiplicação, além de descrever aspectos limitantes da cultura durante os trabalhos in vitro. Foram utilizadas microestacas de 1,0 cm, com uma gema axilar, coletadas de plantas adultas do campo. Tratamentos de desinfestação foram testados no estabelecimento, além de se avaliar a inluência do mês do ano da coleta sobre as taxas de contaminação. Após desinfestadas, as microestacas foram inoculadas em tubos de ensaio com meio MS, suplementado com BAP (0, 1, 2 e 3 mg L -1 ) e AG 3 (0 e 0,5 mg L -1 ). Foi obtido o estabelecimento in vitro da sacaca com 41,9% das microestacas brotadas. A taxa de contaminação alcançou 58,1% (65,4% de origem fúngica e 34,6% de origem bacteriana), com maior ocorrência quando os propágulos foram coletados entre os meses de outubro e janeiro, os mais chuvosos da região amazônica. O aumento nas concentrações de BAP e AG 3 no meio de cultura melhorou as taxas de multiplicação do material. Apesar dos resultados obtidos, a espécie apresenta uma série de peculiaridades e limitações ao cultivo in vitro que foram identiicadas e relatadas neste trabalho.
The morphogenic potential of nodal explants of Piper aduncum and Piper hispidinervum (Piperaceae) was investigated and a protocol for rapid micropropagation is described. An experiment based on the saline formulation of Murashige and Skoog (MS) and Wood Plant medium (WPM) combined with different N6-benzylaminopurine (BAP) and 1-naphthalene acetic acid (NAA) concentrations was evaluated. After determining the optimal concentration of growth regulators, the multiplication rates for the species, which were distributed in five subcultures, was assessed, and the number of plantlets produced in this period was recorded. After assessing the plants from all five subcultures, plantlets with well-developed root and shoot systems were transferred to pots containing substrate for acclimatization. The culture of nodal segments of P. aduncum and P. hispidinervum on hormone-free medium was shown to be a suitable method for micropropagation due to the high multiplication rate and good plant development. The use of BAP or BAP + NAA resulted to formation of vitrified multiple shoots and callus formation at the base of the microcuttings. Even at concentrations lower than 1 mg L-1 , the use of BAP resulted in vitrified multiple shoot and callus formation, without significantly improving the multiplication rates. For both species, the first subculture resulted in the greatest number of axillary buds, and mainly for P. hispidinervum, the MS medium was the most appropriate for in vitro multiplication of microcuttings. The species showed 100% root formation, and acclimatization of plants from the fifth subculture in a greenhouse resulted in 100% survival.
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