Es wird eine Methode zur schnellen quantitativen Bestimmung von präzipitierenden Antikörpern beschrieben. Die Äquivalenzzone wird dabei über Trübungsmessungen bei 436 nm, die Antikörpermenge bei 278 rim bestimmt. Antikörper lassen sich so in kurzer Zeit mit 0,7 m/ Serum und einer Genauigkeit von ±3% bestimmen. A micromethod for the rapid quantitative determination of precipitating antibodies in serumA method is described for the rapid quantitative measurement of antibodies. The equivalence zone ist determined by the measurement of turbidity at 436 nm, and the quantity of antibody is determined from the absorption at 278 nm. Antibodies can be determined rapidly in 0.7 m/. serum with an accuracy of ±3%.Die quantitative Bestimmung von präzipitierenden Antikörpern ist für zahlreiche biochemische, immunologische und klinisch-chemische Untersuchungsmethoden notwendig (l, 2, 3, 4, 5) Es wurde ein Verfahren erarbeitet, das schnell, ohne großen apparativen Aufwand und mit geringen Serummengen durchgeführt werden kann: Die Äquivalenzzone wird -durch .Trübungsmessungen bestimmt (3) und die durch die Präzipitation bedingte Abnahme des Proteins um die Antikörpermenge mit dem Spektralphotometer bei 278 nm gemessen. Material und MethodenImmunisierung Kaninchen mit einem Körpergewicht von 2,5 bis 3,5 kg wurden mit Human-Serum Albumin (Behring-Werke) oder Vollserum in FREUNDschem Adjuvans immunisiert. Mit der ersten Injektion wurden 30 mg Protein gegeben. Nach drei Wochen erfolgte eine zweite Injektion mit 20mg Eiweiß. 14 Tage nach der letzten Injektion wurden die Tiere in Evipannarkose entblutet. Antikaninchen-y-Globulin vom Hammel wurde, wie früher beschrieben, durch Injektionen von Kaninchen-y-Globulin in FREUNDschem Adjuvans gewonnen (6). Das Kaninchen-y-Globulin wurde durch zweimaliges Fällen mit Ammoniumsulfat und Trennung an Sephadex G 25 und DEAE Sephadex A 50 prä-pariert (6, 5).Photometrische Messungen wurden mit dem Photometer Eppendorf 1100M durchgeführt und falls erforderlich mit dem Kompensationsschreiber 4412 kontinuierlich registriert. Die Trübung wurde bei einer Wellenlänge von 436 nm in Mikroküvetten, das Streulicht bei der gleichen Wellenlänge in 0,5 cm-Küvetten gemessen. Die Reaktionstemperatur in Durchlaufküvetten betrug 25°, der pH-Wert 7,5, die Salzkonzentration 0,15M NaCl. Mit Antigenmengen, die einen Proteingehalt von 33,6/^g; 67//g; 100 ^g; 134,5/ig und 201//g hatten, wurden Trübungs-und

Es wird eine Methode beschrieben, Proteine und Glykoproteine nach clektrophoretischer Auftrcnnung auf einem Streifen anzufärben. Mit Tartrazin für die Proteinfärbung und rosanilinschwefliger Säure für die Kohlenhydratfärbung wurden Farbstoffe gewählt, deren Absorptionsmaxima so weit auseinander liegen, daß bei der Messung des einen die Absorption des anderen Farbstoffs praktisch zu vernachlässigen war. Eine exakte Zuordnung dieser beiden Serumbestandteiic zueinander ist so möglich. Bei der Anwendung der Methode im klinisch-chemischen Laboratorium konnten Besonderheiten im Verhalten von Proteinen zu Glykoproteinen bei Paraproteinämien (Plasmocytom und M. WALDENSTRÖM) aufgezeigt werden. The combined electrophoretic separation of proteins and carbohydrates on one stripA method is described for the location of both proteins and glycoproteins on the same electrophoresis strip. Using tartrazine for the protein and rosaniline-sulphurous acid for the carbohydrate, colours are obtained with widely different absorption maxima, so that each may be measured with practically no interference by the other. Each serum component can therefore be exactly identified. In the clinical chemical laboratory, the method revealed peculiarities in the ratio of proteins to glycoproteins in paraproteinemias (plasmacytoma and M. WALDENSTRÖM).

Farbstoffbindungsuntersuchungen an denaturierten Proteinfraktionen nach COHNT mit ungereinigten und gereinigten Afcofarbstoflen (Amidoschwarz 10 B, Neucoccin und Ponceau S) führen zu folgenden Ergebnissen: 1. Ungereinigte Farbstoffe werden nicht linear-proportional an Serumproteinfraktionen gebunden. 2. Gereinigte, einheitliche Farbstoffe werden linear-proportional an alle Proteinfraktionen des Serums gebunden. Für Ponceau S, gereinigtes Amidoschwarz und Neucoccin wurde die Farbstoff bindung in mg pro l mg Protein bestimmt. Auf Grund dieser Werte errechneten wir Korrekturfaktoren für die'Anfärbbarkeit der Serumproteinfraktionen, die bei der photometrischen Auswertung der Celluloseacetat-Folien-Elektrophorese angewendet werden müssen. Wird Ponceau S verwendet, betragen die Faktoren für Albumin 1,0, für ot-Globulin 1,50, für 0-Globulin 1,68 und für y-Globulin 1,42. Mit Hilfe dieser Faktoren kann die Auswertung der Serumelektrophorese in der Routinediagnostik exakter und fehlerfreier erfolgen. Determination of correction factors for protein-dye binding in strip electrophoresisThe binding of unpurified and purified azo dyes (amide black 10 B, neucoccin and ponceau S) to denatured protein fractions according to COHN was studied. 1. The proportional binding of unpurified dyes to serum protein fractions is non-linear. 2. The proportional binding of purified, homogeneous dyes is linear for all serum protein fractions. The dye binding in mg per 1 mg protein was determined for ponceau S, purified arnido black and neucoccin. From these values, correction factors were calculated for the intensity of serum protein fractions, which must be used in the photometric evaluation of cellulose acetate strip electrophoresis. With ponceau S, the factors are: albumin, 1.0; -globulin, 1.50; jft-globulin, 1.68; y-globulin, 1.42. The use of these factors permits af more exact and error-free evaluation of serum electrophoresis in routine diagnosis.

Vorgang Stellung des Dezimalrades: 3 1. Programmkarte bl durchlaufen lassen. 2. Taste 'Z' drücken. 3. Eichwert 1 0 eintasten. 4. Taste 'S' drücken. 5. Schritte 3 u. 4 mit I lf I a , I" I 4(I, wiederholen. Anschließend Programm b2 durchführen. Nicht die Löschtaste drückenl 6. Programmkarte b2 durchlaufen lassen. 7. Taste 'W drücken. 8. Patienten-Nr. eintasten. 9. Taste 'S' drücken. 10. Die Analysen-Nummer wird mit 0 ausgedruckt. 11. Meßwert ' eintasten. 12. Taste 'S' drücken. 13. Das Ergebnis wird mit ausgedruckt. 14. Schritte 8-13 mit weiteren Meßwerten I wiederholen.

Es wird ein einfaches Verfahren beschrieben, Azofarbstoffe an Sephadex G 25 fcu reinigen. Neucoccin und Amidoschwarz 10 B lassen sich in jeweils 5 verschiedene Farbstoffe auftrennen, während Ponceau S selbst nach mehrmaliger Chromatographie als einheitlicher Farbstoff eluiert wurde.The preparation of pure dyes suitable for staining electrophoretograms A simple method is described for the purification of azo dyes on Sephadex G 25. Neucoccin and amido black 10 B are each separated into 5 different dyes, while Ponceau S remains homogeneous after repeated chromotography.