The karyotypes of four species of freshwater triclads of the genus Girardia (Platyhelminthes), i.e. G. schubarti, G. tigrina, G. anderlani, and G. biapertura, from populations of different localities of the Rio Grande do Sul State, in southern Brazil, were analyzed. The karyotype of G. biapertura is presented for the first time. Three basic complements of 4, 8, and 9 chromosomes were found. Diploids, triploids, or mixoploids (2n/3n) specimens were frequently detected in these populations. The basic chromosomal complement of n = 9 was verified in two different species (G. biapertura and G. anderlani), presenting a large acrocentric chromosome which is rare in the family Dugesiidae. An intra and interspecific chromosomal variability was also detected and its evolutionary implications are discussed.Keywords: freshwater planarians, cytogenetics, genetic plasticity, chromosome variability. Polimorfismo e complementos cromossômicos em populações de espéciesde Girardia (Platyhelminthes, Tricladida, Paludicola) do sul do Brasil ResumoOs cariótipos de quatro espécies de planárias de água doce do gênero Girardia (Platyhelminthes), a saber, G. schubarti, G. tigrina, G. anderlani e G. biapertura, de populações ocorrentes em diferentes locais do estado do Rio Grande do Sul, na região sul do Brasil, foram analisados. O cariótipo de G. biapertura é apresentado pela primeira vez. Foram observados três complementos básicos, de 4, 8 e 9 cromossomos. Espécimes diplóides, triplóides e mixoplóides (2n/3n) foram observados freqüentemente nessas populações. O complemento cromossômico básico de n = 9 foi verificado em duas espécies (G. biapertura e G. anderlani), apresentando um grande cromossomo acrocêntrico que é raro na família Dugesiidae. Também foi observada certa variabilidade cromossômica, tanto intra-como interespecífica, cujas implicações evolutivas são discutidas.Palavras-chave: planárias de água doce, citogenética, plasticidade genética, variabilidade cromossômica.