No abstract

No abstract

Иммуногенные свойства изолятов и штаммов Avibacterium paragallinarum серогруппы В РЕЗЮМЕ Инфекционное заболевание кур, вызываемое бактерией Avibacterium рaragallinarum, остается одной из актуальных проблем птицеводческой отрасли, о чем говорят многочисленные сообщения о периодических вспышках инфекционного ринита кур в разных странах мира. Проведенные с 2014 по 2019 г. бактериологические исследования показали, что Российская Федерация эндемична по данному заболеванию, вызываемому Avibacterium paragallinarum серогруппы В. Представлены результаты исследования по изучению иммуногенных свойств антигенов 13 изолятов возбудителя инфекционного ринита кур, выделенных из патологического материала, доставленного в ФГБУ «ВНИИЗЖ» с птицефабрик Российской Федерации и Республики Беларусь. Для этого готовили образцы вакцины, содержащей в своем составе инактивированные формалином клетки Avibacterium рaragallinarum и масляный адъювант. Птиц иммунизировали с последующим контрольным заражением гомологичными и гетерологичными изолятами. Степень проявления клинических признаков заболевания оценивали по методике, предложенной V. E. Soriano. Образец вакцины на основе антигена изолята АрВ08 индуцировал недостаточный иммунный ответ у птиц при инфицировании изолятами АрВ04 и АрВ12. В свою очередь, при заражении изолятом АрВ08 был показан высокий уровень защиты животных. Изоляты АрВ04, АрВ08 и АрВ12 были всесторонне изучены, определены как наиболее перспективные для производства вакцины против инфекционного ринита кур и депонированы в Государственную коллекцию штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ» под номерами 1116, 5111 и 1818 соответственно. Также была проведена сравнительная оценка иммуногенной активности экспериментальной вакцины против инфекционного ринита кур, включающей антигены штаммов № 1116, 5111 и 1818, с двумя коммерческими препаратами. Экспериментальный препарат показал максимальный процент защиты птиц при заражении гомологичными штаммами Avibacterium рaragallinarum.Ключевые слова: инфекционный ринит кур, изоляты, штаммы, вакцина, контрольное заражение, Avibacterium paragallinarum.Благодарность: Работа выполнена за счет средств ФГБУ «ВНИИЗЖ» в рамках тематики научно-исследовательских работ «Ветеринарное благополучие».

The paper demonstrates results of testing different modes of Avibacterium paragallinarum inactivation with formaldehyde and thiomersal. The bacterium destruction by 0.20% and 0.10% formaldehyde proceeds at the constant rate thus indicating exponential dependence of the microorganism inactivation processes. This fact allows for calculation of the inactivation rate constant that amounts to 2.94 ± 0.37 h-1 for 0.10% formaldehyde and 5.86 ± 0.72 h-1 for 0.20% formaldehyde. Inactivation using formaldehyde at final concentration of 0.10% at 37 °С and continuous stirring (60 rpm) produces 7.0 dm3 of bacterin at concentration of 9.5 ± 0.2 lg microbial cells (mc)/cm3 in 4.3 ± 0.1 h. Thiomersal demonstrated bactericidal action against Avibacterium paragallinarum at concentration of 0.04% (1:2500) or higher. Herewith, inactivation process is specified by linearity and the inactivation rate constant amounts to 7.92±1.12 h-1. Under thiomersal sublethal concentration of 0.2% (1:5000) the survival curve is of irregular shape. However, the process of the microorganism death is not exponential, and under continuous decrease, the inactivation rate is going to zero thus making impossible the calculation of the inactivation rate constant. Inactivation mode involving use of 0.04% thiomersal at 37 °С allows production of 7.0 dm3 of bacterin at 9.5 ± 0.2 lg mc/cm3 concentration in 5.8 ± 0.1 h. Right after production, the hemagglutination activity of the thiomersal inactivated antigen was higher as compared to formaldehyde inactivated antigen (Р  0.05). The antigen produced using formaldehyde maintains high hemagglutination activity during storage that is critical for high quality vaccine production.

Different liquid nutrient media supplemented with growth factors intended for Avibacterium paragallinarum strain No. 5111 cultivation were com­pared. The highest specific growth rate (μ = 0.787 ± 0.041 h-1) and the maximal accumulation of the agent’s biomass (Х = 9.52 ± 0.04 lg CFU/ cm3) were reported when cultured in casein soybean broth. Herewith, the mean time of the live microbial cell concentration doubling was minimal (td = 0.88 h), and the exponential growth phase lasted for 6 hours. The optimal method for Avibacterium paragallinarum cultivation in casein soy­bean broth in laboratory bioreactor Biotron LiFlus GX was determined through the measurements and adjustment of basic physical and chemical parameters. The time period until the culture reached the stationary growth phase was maximal with aeration at 1.0 l/min; herewith, the O2 partial pressure in the nutrient medium did not exceed 25%. The period of the intense decrease of medium’s pH was accompanied with the exponential phase of the bacterial growth. The nutrient medium’s pH ranging from 7.30 ± 0.02 to 7.90 ± 0.06 had no significant impact on the specific growth rate of the strain and the lag phase duration was minimal – 0.36–0.45 h. The strain cultivation in the nutrient medium with pH 7.90 ± 0.06 demonstrated maximal aggregation of the bacteria (9.76 ± 0.04 lg CFU/cm3). 40% glucose solution added at 0.6-0.8 g/l during cultivation facilitated the decrease of the suspension’s pH. Minimal redox value (–75 mV) was indicative of the completion of the exponential phase of the strain growth.