To identify C-MYC targets rate-limiting for proliferation of malignant melanoma, we stably inhibited C-MYC in several human metastatic melanoma lines via lentivirus-based shRNAs approximately to the levels detected in normal melanocytes. C-MYC depletion did not significantly affect levels of E2F1 protein reported to regulate expression of many S-phase specific genes, but resulted in the repression of several genes encoding enzymes rate-limiting for dNTP metabolism. These included thymidylate synthase (TS), inosine monophosphate dehydrogenase 2 (IMPDH2) and phosphoribosyl pyrophosphate synthetase 2 (PRPS2). C-MYC depletion also resulted in reduction in the amounts of deoxyribonucleoside triphosphates (dNTPs) and inhibition of proliferation. shRNA-mediated suppression of TS, IMPDH2 or PRPS2 resulted in the decrease of dNTP pools and retardation of the cell cycle progression of melanoma cells in a manner similar to that of C-MYC-depletion in those cells. Reciprocally, concurrent overexpression of cDNAs for TS, IMPDH2 and PRPS2 delayed proliferative arrest caused by inhibition of C-MYC in melanoma cells. Overexpression of C-MYC in normal melanocytes enhanced expression of the above enzymes and increased individual dNTP pools. Analysis of in vivo C-MYC interactions with TS, IMPDH2 and PRPS2 genes confirmed that they are direct C-MYC targets. Moreover, all three proteins express at higher levels in cells from several metastatic melanoma lines compared to normal melanocytes. Our data establish a novel functional link between C-MYC and dNTP metabolism and identify its role in proliferation of tumor cells.

No abstract

We studied the effect of Herceptin therapy on the population composition of lymphocytes and percentage of CD4+CD25+ cells (regulatory T cells) in breast cancer patients. Herceptin treatment decreased the number of "professional" T suppressors (CD4+CD25+ cells and regulatory T cells) in the peripheral blood.

No abstract

Резюме. Химиотерапия является одним из основных методов лечения распространенных форм рака молочной железы. Установлено, что клиническая эффективность различных химиопрепаратов во многих случаях зависит не только от их прямого цитостатического и/или цитотоксического действия на опухолевые клетки, но и от их способности модулировать фенотип опухолевых клеток и воздействовать на противоопухолевый иммунный ответ. При этом решающее значение имеет исходное состояние иммунной системы организма и ее реакция на проводимое лечение. В ответе на опухоль участвуют клетки врожденного и адаптивного иммунитета (NK-, NKT-, Т-клетки). Эти популяции являются гетерогенными и содержат в своем составе как клетки с противоопухолевой активностью, так и регуляторные (супрессорные) клетки, подавляющие иммунный ответ и способствующие опухолевой прогрессии. Целью настоящей работы явилось определение связи исходного состояния клеточного иммунитета больных с местно-распространенным раком молочной железы с тройным негативным фенотипом и клиническим эффектом химиотерапии (цисплатин + доксорубицин/паклитаксел), а также изучение влияния проведенного лечения на субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови пациенток. Отмечался момент наступления прогрессирования заболевания, определялись общая выживаемость и выживаемость без прогрессирования. У 25 из 53 (47,2%) включенных в исследование пациенток в течение периода наблюдения (35,5 месяцев) заболевание прогрессировало. У 28 из 53 (52,8%) прогрессирования заболевания не наблюдалось. Иммунологическое обследование пациенток включало иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови и определение цитотоксической активности NK-клеток до и после химиотерапии. Определяли процентное содержание эффекторных и регуляторных популяций лимфоцитов. Полученные результаты показали, что до начала лечения отмечались различия в отклонениях процентного содержания клеток некоторых популяций лимфоцитов от контроля между группами без прогрессирования и с прогрессированием заболевания. Наиболее значительные различия касались NKT-клеток и лимфоцитов, экспрессирующих активационный маркер CD25. Снижение количества NKT-клеток и акти-Адрес для переписки: Кадагидзе Заира Григорьевна ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина» Министерства здравоохранения РФ 115478, Россия, Москва, Каширское шоссе, 24. Тел.: 8 (495) 324-94-74.