1 Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет, Краснодар, Российская Федерация 2 ГБУЗ «Научно-исследовательский институт -Краевая клиническая больница № 1 имени профессора С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края, Краснодар, Российская Федерация Цель исследования -оценить перспективы использования процессов децеллюляризации и рецеллю-ляризации легких крысы как начального этапа создания тканеинженерных конструкций. Материалы и методы. Децеллюляризацию легких крысы выполняли перфузионным детергент-энзиматическим мето-дом при сопутствующей вентиляции трахеи атмосферным воздухом. Качество проведенной децеллюля-ризации оценивали с использованием рутинных гистологических и иммуногистохимических методов исследования, количественное содержание ДНК определяли спектрофотометрически. Для статической рецеллюляризации и перфузионной рецеллюляризации целого органа в качестве модели для изучения поведения клеток на каркасе использовали мезенхимальные мультипотентные стромальные клетки с последующей оценкой метаболической активности клеток колориметрическим методом и их жизнеспо-собности -путем окрашивания кальцеином и гомодимером этидия. Для качественной оценки матрикса легких после рецеллюляризации использовали иммуногистохимический анализ. Результаты. 92% ал-логенной ДНК удалено при проведении децеллюляризации. Гистологическое окрашивание не выявило остаточных клеток и клеточных ядер при сохранности волокон внеклеточного матрикса, что подтверж-далось иммуногистохимической реакцией матрикса с антителами к ламинину, эластину, фибронектину, коллагенам I и IV типов до и после проведения децеллюляризации. Каркас при заселении клетками не проявляет токсических свойств, поддерживает жизнеспособность и метаболическую активность клеток. Заключение. Полученный опыт децеллюляризации и рецеллюляризации легких крысы является перс-пективной основой для разработки протоколов создания тканеинженерных легких.Ключевые слова: децеллюляризация, рецеллюляризация, тканеинженерные легкие крысы. Aim. The main aim of our research is to evaluate the process of rat lung decellularization and recellularization as the initial step of tissue-engineered organs creation. Materials and methods. Rat lung decellularization was performed by perfusion with detergents and enzymes with concomitant atmospheric air ventilation through the trachea. The quality of decellularization was analyzed with routine histological and immunohistochemical staining techniques, DNA content was determined quantitatively by spectrophotometer. For static and whole organ EXPERIENCE OF PERFUSION RECELLULARIZATION OF BIOLOGICAL LUNG SCAFFOLD IN RATS

A rapidly growing development of tissue engineering promotes the increasing interest in the obtainment of various decellularizedtissues and organs. Minimal quality evaluation criteria of obtained tissue engineered constructions have been previously specified. In the discussionpaper the group of authors considers the morphological methods of matrix evaluation applied by various researchers on the model of heart decellularization. The analysis of modern literature and the authors’ own researches have shown that morphological evaluation of decellularization quality has to be complex and should consist of several stages which include both basic and additional evaluation methods.

No abstract

No abstract