The possibility of post-vaccination anti-plague immunity evaluation was researched using antigen-stimulated cells tests in vitro and cytometry analysis. The object of study — the blood samples of 17 people immunised by the live plague vaccine (Yersinia pestis EV) epicutaneously. Blood taking was carried out before vaccination and after immunisation on 7 and on 21 days, in 3 and in 6 months. Intensity antigen reactivity of lymphocytes was detected by cell tests in vitro, analysing markers of early (CD45+CD3+CD25+) and late (CD45+CD3+HLA-DR+) lymphocyte activation using flow cytometry. The complex of water-soluble Y. pestis antigens and allergen — pestin PP was tested as antigen. The high stimulating potential was defined of the water-soluble antigens Y. pestis complex. It is shown that coefficient of stimulation of relative level T- lymphocytes which express receptors for IL-2 was positive for all observation times after immunisation. The coefficient of stimulation had maximum values at 21 days (56.37%) and at 3 (47.41%) months. In identifying HLADR-positive lymphocytes before vaccination, the negative coefficient of stimulation was indicated on 7 and 21 days and the positive coefficient of stimulation was indicated at 3 and at 6 months. Analysis of intensity expression of early and late lymphocyte activation markers dynamics showed the possibility and prospect of application of cellular in vitro tests for the laboratory evaluation of specific reactivity of cellular immunity in both the early (7 days) and late (6 months) periods after vaccination. The results can be the basis for developing a new algorithm for assessment of immunological effectiveness of vaccination people against plague. It is the algorithm based on the identification of lymphocyte activation markers by antigen stimulation in conditions in vitro.
Резюме. Бруцеллез остается одной из наиболее актуальных опасных инфекций в регионах с развитым живот-новодством. Исключительный полиморфизм симптомов, многообразие форм болезни, малая информатив-ность результатов рутинного лабораторного общеклинического обследования нередко приводят к диагно-стическим ошибкам на догоспитальном этапе. Усовершенствование комплекса лабораторной диагностики бруцеллезной инфекции требует разработки современных дополнительных методов верификации, осно-ванных на клеточных факторах иммунитета как ведущих в иммуногенезе и патогенезе бруцеллеза. Учиты-вая ведущую роль клеточного иммунитета в формировании защиты от большинства бактериальных особо опасных инфекций, изучение клеточной реакции в ответ на антигенную стимуляцию следует считать наи-более информативным (маркерным) и объективным при оценке иммунологической перестройки организма при болезни или вакцинации. Перспективными показателями специфической клеточной антигенреактив-ности могут выступать следующие маркеры (рецепторы) активации лимфоцитов: CD25 -высокоаффинный рецептор интерлейкина 2 (IL-2Ra), маркер ранней активации Т-лимфоцитов; HLA-DR -антиген главного комплекса гистосовместимости класса II, экспрессия маркера ассоциирована не только с поздней, но и с дли-тельной активацией лимфоцитов; CD95 (Fas, APO-1) -рецептор индукции апоптоза («клеточной смерти»), маркер «поздней» активации (представлен преимущественно на CD4 + лимфоцитах) и Fas L (CD178) -ре-цептор индукции апоптоза, экспрессируется в основном на CD8 + клетках. Цель работы -оценить возмож-ность и перспективность применения технологии проточной цитофлуориметрии и клеточных тестов in vitrо для диагностики острого бруцеллеза. В исследовании участвовало 35 человек с диагнозом «острый бруцеллез» и 12 человек -не больные, не переболевшие бруцеллезом, не вакцинированные против бруцеллеза (конт-рольная группа). Материалом исследования послужила венозная кровь. Определяли количество лимфоци-тов, экспрессирующих рецепторы CD25, HLA-DR, CD95, CD95L (CD178) при активации специфическим антигеном. Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием приложений Microsoft Excel 2010. В ходе исследования установлено, что интенсивность антиген-стимулированной активации лим-фоцитов in vitro можно использовать в качестве маркера острой бруцеллезной инфекции у человека. Наибо-лее перспективными показателями активации лимфоцитов in vitro, можно считать рецепторы к IL-2 (CD25)
Analysis of the incidence of human brucellosis in the world in 2011–2020 is presented in the paper. An assessment of the epizootiological-epidemiological situation on brucellosis in the Russian Federation in 2020 is performed. It is outlined that the epidemiological situation on brucellosis in Russia over the past decade was characterized as unfavorable with downward trend in the incidence rate against the background of persistent epizootiological insecurity among cattle and small ruminants. Between 2011 and 2020, 3507 first identified human cases of brucellosis were registered. The long-term average number of cases is 350 per year, including 28 cases among children under 17 years old. The average long-term intensive morbidity rate per 100 000 people was 0.24, among children under 17 – 0.1. In 2020, 119 human cases of brucellosis were detected in Russia (0.08), which indicates that the trend towards an improvement in the epidemiological situation on brucellosis continues. The largest number of brucellosis cases among people was registered in the North-Caucasian (77.1 % of the total incidence across Russia) and the Southern Federal District (13.5 %). In the period of 2010–2020 (9 months), 4610 areas potentially hazardous as regards bovine brucellosis and 422 – as regards brucellosis in sheep and goats were registered in the Russian Federation. Analysis of the development of brucellosis situation in Russia indicates that in the medium term, with the current trend maintained, there is a real risk of widespread brucellosis distribution among farm animals in the constituent entities of the Central, Volga, Far Eastern and Siberian Federal Districts, as well as the persistence of epizootiological insecurity in the North Caucasus and Southern Federal Districts. Taking into account the current epizootiological-epidemiological situation and the long-term dynamics of the development in the Russian Federation, one can predict the incidence of brucellosis in people at a level below the longterm average values – 0.13–0.18 per 100000 of the population in 2021.