АНЕСТЕЗИОЛОГИЯ И РЕАНИМАТОЛОГИЯ Резюме.Цель -разработать способ определения процентного содержания дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) в составе биопленки и установить его значимость в патогенезе тяжелых респираторных инфекций и моделировании исхода заболевания. Материал и методы. Изучено 238 изолятов, выделенных из мокроты и зева 175 пациентов из Витебской областной клинической больницы и амбулаторно-поликлинических учреждений в течение 2016-2019 гг. Пациенты были разделены на две группы: в 1-ой группе из 139 человек (79,4%) пациенты имели тяжелые респираторные инфекции, во 2-ой группе из 36 человек (20,6%) -инфекции дыхательных путей средней степени тяжести. Результаты и обсуждение. Разработан способ определения процентного содержания ДНК в составе микробного сообщества с использованием в качестве флуорохрома раствора красителя 4'6-диамидино-2-фенилиндол дигидрохлорид. Средний возраст 1-ой группы был выше второй (p<0,05). Наибольшую массу образуемой биопленки, а также процентное содержание ДНК имела P. aeruginosa, выделенная при тяжелых респираторных инфекциях в ОРИТ, составив 48,25 [30,5-70,1] мкг/мл и 5,21 [2,17-7,67] %, p=0,04. Выявлена сильная связь между процентным содержанием ДНК в биопленке P. aeruginosа и степенью тяжести заболевания r=0,73, слабая -при Acinetobacter spp., r=0,35, p<0,05. Частота неблагоприятного исхода при выделении антибиотикоустойчивых изолятов была выше, чем при выделении антибиотикочувствительных (p<0,05). Анализ результатов позволил предположить летальный исход с высокой степенью вероятности при массе микробной биопленки >47,5 мкг/лунку и процентном содержании ДНК в ее составе >2,33% (р<0,01). Заключение. Предложен способ определения процентного содержания ДНК в составе микробного сообщества, позволяющий судить об агрессивности микроорганизма и тяжести вызываемой им инфекции, что дает возможность обеспечить персонифицированный подход к выбору антибактериальной терапии на основе способности лекарственного средства проникать через биопленку. Ключевые слова: антибиотикорезистентность, биопленка, дезоксирибонуклеиновая кислота, 4'6-диамидино-2фенилиндол дигидрохлорид.

Objectives. To study the dependence of the formation intensity of microbial biofilms by isolates from patients on the severity and localization of the infectious process. Material and methods. The study conducted from 2016 to 2020 included 894 clinical isolates from 720 patients with infectious pathology of various localization and severety. The formation intensity of microbial biofilms by isolates received from these patients has been studied, depending on the severity and localization of the infectious process. Results. The property to form biofilms was found out in the overwhelming majority of tested isolates (86.6%). At the same time P. aeruginosa isolates had the maximum biofilm-forming ability, the weight of the microbial biofilm of which was 48.25; 30.1-70.2 mcg/well. The conducted studies have shown the dependence of biofilm formation on the severity of the disease in which isolates were isolated. A direct close relationship was found between the severity of the disease and the mass of microbial biofilm of P. aeruginosа and K. pneumoniae, a weak one - in Acinetobacter spp. (r=0.73, r=0.7 and r=0.35, p<0.05 accordingly). Conclusions. It can be assumed that intensive formation of biofilms by clinical isolates is an important factor of the aggressiveness and severity of the infectious process. Moreover, the conducted study has shown the dependence of biofilm formation on the severity of the disease in which isolates were isolated.

УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», г. Витебск, Республика Беларусь Аннотация. В современных концепциях патогенеза заболеваний периодонта, вызванных условно-патогенными бактериями, значительное внимание уделяется способностью микроорганизмов образовывать биопленку. Цель исследования -оценить способность микроорганизмов периодонтального кармана образовывать бактериальные сообщества и определить степень разрушения их экзополимерного матрикса антисептиками и ферментами. Ма-териалы и методы. С помощью разработанных методов культивирования и исследования, микробных биоплёнок изучены свойства 83 клинических изолятов, выделенных от пациентов с хроническим периодонтитом. Резуль-таты. Определен более высокий уровень продукции биопленки среди изолятов одонтогенного происхождения у Streptococcus mutans и эпидермального стафилококка (р>0,05). С помощью предложенной экспериментальной модели установлено, что среди антисептиков и ферментов наиболее сильно разрушает биопленку 25% диметил-сульфоксид и гиалуронидаза Iа типа. Ключевые слова: биопленка, микрофлора, ферменты, антисептики, болезни периодонта В настоящее время в Республике Беларусь распространенность болезней периодонта в воз-растной группе 35-44 года остается высокой и колеблется по данным эпидемиологических ис-следований различных авторов от 92,5 ± 2,95 % до 100 % 1.В последние десятилетия постепенно на смену концепции планктонных форм микроб-ного возбудителя заболеваний периодонта при-шли теории ассоциации микробных сообществ -биоплёнок (БП). Многие аспекты функциониро-вания данной многоуровневой системы, их пора-зительная устойчивость к физическим и биохи-мическим воздействиям [2], до сих пор остаются не изученными.Цель исследования. оценить способность микроорганизмов периодонтального кармана об-разовывать бактериальные сообщества и опреде-лить степень разрушения их экзополимерного матрикса антисептиками и ферментами.Материалы и методы. С целью изучения продукции биопленки бактериями периодон-тального кармана было обследовано 89 пациен-тов с хроническим периодонтитом и 25 практи-чески здоровых лиц, от которых выделено и идентифицировано 83 клинических изолята.Для определения способности изолятов к об-разованию БП был использован разработанный ранее метод с применением 96-луночного поли-стиролового пластикового планшета 3. Для пе-ресчета единиц оптической плотности в вес мик-робной БП в мкг на одну лунку 96-луночного планшета, использовалась следующая формула: Х= 226,28*[Еоптическая плотность пробы -Еоптическая плотность контроля] 1,2755Биопленки получали после культивирования в течение 3 суток, используя клинический изолят S. oralis выделенный от пациента с хроническим периодонтитом.

SPECTROPHOTOMETRIC ANALYSIS OF THE EFFECTS OF ANTISEPTICS AND ENZYMES ON THE EXOPOLYMERIC MATRIX OF BACTERIAL BIOFILMS

No abstract