Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов Цель. Изучение цитотоксического воздействия штаммов Yersinia pestis с различной степенью вирулентности на лейкоциты цельной дефибринированной крови человека. Материалы и методы. В работе использовано 15 штаммов Y. pestis. ДНК-гистограммы регистрировали с помощью проточного цитофлуориметра. Результаты. Экспериментально обоснована возможность использования показателя цитотоксичности для дифференциа ции штаммов Y. pestis на вирулентные и авирулентные. Полученные данные сопоставимы с показателем LD50 для мышей и не противоречат молекулярно-генетическим характери стикам штаммов. Заключение. Предлагаемый подход позволяет получать достоверные результаты и является перспективным для оценки вирулентности штаммов Y. pestis.

МИКРОБИОЛОГИЯ 452017, issue 2 в схеме лабораторной диагностики чумы био-логический метод является обязательным на этапах индикации, выделения и накопления бактериальной культуры [6, 8]. традиционно освоение биологиче-ского метода исследования на практических заняти-ях по подготовке специалистов в рамках учебного модуля «микробиология и лабораторный диагноз чумы» проводят с использованием вирулентных штаммов Y. pestis (I группа патогенности). это по-зволяет наблюдать клинические проявления чумы у зараженных животных, типичные патоморфоло-гические изменения в подкожной клетчатке и вну-тренних органах, выделять бактериальную культуру путем посева на питательные среды проб паренхи-матозных органов.однако слушатели курсов дополнительного профессионального образования зачастую не имеют должного опыта выполнения микробиологических манипуляций в соответствии с правилами биологи-ческой безопасности, что повышает риск аварий и/ или лабораторных заражений. это обусловливает не-обходимость исключения или максимально возмож-ного сокращения использования в технологических процессах вирулентных штаммов микроорганизмов в том числе в процессе обучения, согласно концеп-ции «основы государственной политики в области биологический метод исследования регламентирован при лабораторной диагностике чумы. освоение данного метода специалистами в рамках дополнительного профессионального образования связано с использованием на практических занятиях вирулентных штаммов Yersinia pestis и вакцинного штамма Y. pestis линии еV, который, обеспечивая биобезопасность, не позволяет изучить типичную патоморфологическую картину на биомоделях, а также выделить микроорганизмы из внутренних органов. цель. подбор авирулентных штаммов Y. pestis и срав-нительный анализ способов моделирования с их помощью чумы на биомоделях. материалы и методы. в работе использованы штаммы Y. pestis. вирулентность оценивали in vitro (полимеразная цепная реакция) и in vivo (по-казатель LD 50 на белых мышах). результаты и выводы. предложены авирулентные штаммы Y. pestis, перспек-тивные в качестве учебных для освоения биологического метода лабораторной диагностики чумы, и способ их применения для моделирования чумы у биомоделей. предложенный подход позволяет слушателям курсов допол-нительного профессионального образования освоить в полном объеме биологический метод исследования чумы, повышая обеспечение биобезопасности практических занятий и сокращая сроки выделения и накопления чистой культуры бактерий.Ключевые слова: биологическая безопасность, подготовка специалистов, биологический метод исследования, возбудитель чумы, учебные штаммы, лабораторная диагностика чумы. Biological method of investigation is specified for the laboratory diagnostics of plague. Mastering of this method by the trainees within the frames of further vocational education is associated with the use of avirulent Yersinia pestis strains and vaccine Y. pestis strain EV line, which while providing safety does not allow for typical pathomorphological pattern on biomodels, as well as for isolation of microorga...

, Т.а. малюкова, Ю.а. Попов, м.н. ляпин раЗраБотКа МетодичеСКих подходов и Критериев для отнеСения учеБнЫх штаММов Yersinia рestis К III группе патогенноСти (опаСноСти) ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов, Российская Федерация цель исследования-выбор критериев и методических подходов для перевода авирулентных штаммов возбудителя чумы из I группы патогенности (опасности) в III группу. материалы и методы. проанализированы отечественные и зарубежные нормативные, методические документы, научные публикации в области лабораторной диагностики чумы и обеспечения биобезопасности работ с патогенными биологическими агентами. результаты и обсуждение. обоснован комплекс критериев для перевода штаммов Y. pestis из I группы в III группу патогенности, а также определены методы их оценки. установлено наличие оснований для перевода в III группу патогенности ряда авирулентных штаммов Y. pestis, которые включены в учебный набор, сформированный для освоения модуля «микробиология и лабораторная диагностика чумы». продемонстрирована целесообразность комбинирования регламентированных методов оценки патогенных свойств чумного микроба с дополнительными, в частности, изучением цитотоксичности штаммов Y. pestis в отношении лейкоцитов цельной крови человека in vitro. оценка вирулентности штамма Y. pestis должна опираться на комплексную характеристику основных факторов патогенности с помощью современных молекулярно-генетических методов исследования, данных о фенотипических проявлениях их функционирования, а также степени патогенности для чувствительных лабораторных животных. актуальной задачей является пересмотр используемых количественных показателей для дифференциации штаммов чумного микроба по вирулентности с учетом показателя LD 50 штамма Y. pestis EV нииэг. Ключевые слова: возбудитель чумы, группы патогенности (опасности), биологическая безопасность, учебные штаммы.

The review presents the data covered during the Second International Conference on the Biology of Vibrios "Vibrio 2007" (Paris, from November, 28th to December, 1st, 2007). Set forth are main trends of state-of-the-art vi brios research concerning their biodiversity, the peculiarities of genome ar rangement, pathogenicity, epidemiology and ecology.

Objective of the work was to develop selection criteria for the dummy Y. pestis strains, as well as principles of the setting-up a panel and its application for practicing laboratory and differential diagnostics of plague. Studied were the RF regulations, statutory documents and methodological recommendations on the laboratory diagnostics of plague and safety of works with microorganisms; training courses for specialists to qualify for work with the agents of particularly dangerous infections. Research method: analytical. Consequently, established were the term for “dummy strain”; selection criteria for the Y. pestis strains used in the practical course within the frames of the training programme “Microbiology and Laboratory Diagnosis of Plague”; and algorithm of the course application in view of biological risk mitigation during the process of education.