No abstract

цель работы. разработать и сравнить по чувствительности тесты для одновременного обнаружения ботулотоксинов A, B, C, E, F методом мультиплексного фосфоресцентного анализа (ФосФан) с применением стандартной (на основе Pt копропорфирина) и модифицированной (на основе биоспецифичных наночастиц) систем регистрации фосфоресцентного сигнала. материалы и методы. иммуноанализ по технологии ФосФан выполняли в лунках стандартного 96-луночного микропланшета. на дне каждой лунки были напечатаны в виде микропятен моноспецифические антитела и поливалентный иммуноглобулин. диапазон анализируемых концентраций анатоксинов-от 100 до 0,005 нг/мл. для проявления реакции использовали смесь конъюгированных с биотином моноспецифических и поливалентного иммуноглобулинов и детекторные системы на основе конъюгатов стрептавидина с Pt копропорфирином или полистироловыми наночастицами, содержащими хелат европия. люминесценцию обоих метчиков регистрировали на биочип-анализаторе в режиме временного разрешения. порог детекции определяли как минимальную концентрацию анатоксина, при которой отношение P/N ≥ 2, а число таких проб (в серии из 10-30 экспериментов) не менее 50 %. результаты и выводы. разработанные иммуночипы обеспечивали группоспецифическое обнаружение пяти ботулотоксинов с возможностью типоспецифической идентификации ботулотоксинов а, в и е. перекрестные реакции между ботулотоксинами не выявлены. применение фосфоресцентных наночастиц позволило повысить чувствительность детекции примерно на порядок до 10 пг/мл. разработанные мультиплексные тесты можно рекомендовать для специфической индикации ботулотоксинов в клинических образцах, пробах из объектов окружающей среды или пищевых продуктов.

No abstract

No abstract

No abstract