Термин «вакуумный электрофорез» имеет несколько трактовок, зависящих от области применения. Во-первых, речь идёт о капиллярном электрофорезе на базе мультиплексных вакуумных техник VAMCE (vacuum-assisted multiplexed capillary electrophoresis) и совместимых с капиллярным электрофорезом методов масс- спектрометрии с использованием вакуумированной поверхности раздела сред. Во-вторых, речь идёт о классическом вакуумном блоттинге, используемом как средство более эффективного по сравнению со стандартным блоттингом переноса при анализе нуклеиновых кислот. В-третьих, в медицине под этим понимается метод физиотерапевтического и, реже, интраоперационного и постоперационного воздействия с использованием электрокинетических принципов. Основное распространение в биохимии и молекулярной биологии получил на данный момент вакуумный блоттинг, хотя степень откачки не позволяет говорить о вакуумном характере данного метода в полной мере. Основным приложением вакуумного блоттинга на начальном этапе развития и основным преимуществом, позволяющим говорить о вакуум-трансфер-техниках в молекулярной генетике, являлся саузерн-блоттинг, то есть метод переноса ДНК с агарозного геля на мембранный фильтр для гибридизации. Надо сказать, что одними из первых, кто использовал данный подход, были советские специалисты, причем, в отличие от поздних зарубежных аналогов ими использовались не синтетические полиамидные (нейлоновые), а нитроцеллюлозные мембраны. В настоящее время технологии полностью автономного вакуумного блоттинга в РФ и СНГ утрачены, то есть не могут быть проведены без импортируемых реагентов и комплектующих. Ко времени распада СССР, к концу 1980-х – началу 1990-х гг., за рубежом сложилась комплексная практика вакуумного блоттинга, совместимая с гель-электрофорезом. Был накоплен опыт применения вакуумной техники в нозерн-блоттинге (РНК), в том числе с UV-фиксацией. Сообщалось также о совместимости вакуум-блоттинга с геномным секвенированием и футпринтингом in vivo. На рубеже 1980-х – начала 1990-х годов за рубежом начался промышленный выпуск вакуумных блоттеров. Классическим вакуумным блоттером стал BOEKEL Appligene c встроенным вакуумметром от 0 до 100 мбар, показанный на илл. 3. Этот аппарат считается «рабочей лошадкой» (английский жаргонизм, «workhose») и доселе используется на многих практических работах в англосаксонских и европейских университетах. На его примере можно достаточно наглядно продемонстрировать принцип метода, отображаемый в виде своего рода сендвич-структуры: агарозный гель, нейлоновая мембрана, ватман, пористый мат (все в резиновой рамке). Наличие ватерпаса на панели короба позволяет обеспечивать нормальный градиент распределения. Множество других компактно-планарных моделей представляет собой упрощенные рамочные конструкции такого же типа, но без встроенного манометра / вакуумметра.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
customersupport@researchsolutions.com
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
This site is protected by reCAPTCHA and the Google Privacy Policy and Terms of Service apply.
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.