A prospective study to assess the predictive value for hereditary spherocytosis using five laboratory tests (cryohemolysis test, eosin-5′-maleimide flow cytometry, osmotic fragility test, autohemolysis test, and SDS-PAGE) on 50 hereditary spherocytosis families in Argentina

Abstract

This prospective study was carried out to assess the usefulness of five laboratory tests in the diagnosis of hereditary spherocytosis (HS), based on the correlation of erythrocyte membrane protein defects with clinical and laboratory features, and also to determine the membrane protein deficiencies detected in Argentina. Of 116 patients and their family members tested, 62 of them were diagnosed to have HS. The specificity of cryohemolysis (CH) test was 95.2%, and its cut-off value to distinguish HS from normal was 2.8%. For flow cytometry, cut-off points of 17% for mean channel fluorescence (MCF) decrease and 14% coefficient of variation (CV) increase showed 95.9% and 92.2% specificity, respectively. Both tests showed the highest percentages of positive results for diagnosis. Either CH or flow cytometry was positive in 93.5% of patients. In eight patients, flow cytometry was positive only through CV increase. Protein defects were detected in 72.3% of patients; ankyrin and spectrin were the most frequently found deficiencies. The CV of the fluorescence showed significantly higher increases in moderate and severe anemia than in mild anemia (p = 0.003). Severity of anemia showed no other correlation with tests results, type of deficient protein, inheritance pattern, or neonatal jaundice. CH and flow cytometry are easy methods with the highest diagnostic accuracy. Simultaneous reading of mean channel fluorescence (MCF) decrease and CV increase improve diagnostic usefulness of flow cytometry. This test seems to be a reliable predictor of severity. The type of detected protein deficiency has no predictive value for outcome. Predominant ankyrin and spectrin deficiencies agree with reports from other Latin American countries.

Esferocitosis hereditaria. Revisión. Parte I. Historia, demografía, etiopatogenia y diagnóstico

“…La más frecuente, que se observa en aproximadamente 75% de las familias afectadas, es la autosómica dominante. [6][7][8] En un estudio multicéntrico sobre 143 casos realizado en nuestro país, la incidencia de formas dominantes fue de 84%. 9 Con la excepción de muy aisladas comunicaciones, casi no hay casos conocidos de homocigotas, por lo que se supone que esta situación es incompatible con la vida.…”

“…9 Con la excepción de muy aisladas comunicaciones, casi no hay casos conocidos de homocigotas, por lo que se supone que esta situación es incompatible con la vida. En el restante 20-25% de los casos, ningún padre presenta evidencia hematológica de la enfermedad, y las pruebas de laboratorio confirmatorias son normales o solo presentan alteraciones mínimas; 8,10 son las llamadas formas recesivas o no-dominantes. Si bien se supone que, en estas familias, la transmisión es autosómica recesiva, no se puede descartar en forma absoluta la presencia de casos de transmisión dominante con penetrancia reducida.…”

“…8,9 Estos datos son coincidentes con la mayoría de los publicados en el mundo, que incluye países latinoamericanos, 20-27 aunque difieren de otros en los que se ha comunicado que la deficiencia predominante es de banda 3. [28][29][30][31] La deficiencia proteica produce, a su vez, alteraciones secundarias en la membrana.…”

“…41 Sin embargo, ninguna de estas pruebas puede detectar el 100% de los pacientes. 6,13,50,[55][56][57] La fragilidad osmótica eritrocitaria (FOE), que da resultados positivos en aproximadamente 80% de los pacientes, 8,15,58 es aún considerada el "patrón oro" por algunos autores, 50,55,59 realizada simultáneamente con la autohemólisis (AH), aunque no sirve para diferenciar ESH de la esferocitosis secundaria a otras patologías, como anemia hemolítica autoinmune (AHAI), enfermedad hemolítica del recién nacido por incompatibilidad ABO (EHRN-ABO) o eliptocitosis hereditaria esferocítica. 59,60 Actualmente, se dispone de nuevas pruebas diagnósticas, más específicas y sensibles, que presentan, además, la ventaja de requerir menor cantidad de sangre para el procesamiento.…”

“…59,60 Actualmente, se dispone de nuevas pruebas diagnósticas, más específicas y sensibles, que presentan, además, la ventaja de requerir menor cantidad de sangre para el procesamiento. 8,[61][62][63][64][65] En nuestro país, algunas de estas -criohemólisis hipertónica (CH), citometría de flujo con 5'eosina maleimida (5'EMA-CF), FOE por citometría de flujo (FOE-CF)-se comenzaron a implementar a partir del año 2007.…”