Analysis of free glycerol in biodiesel using an electrochemical assay based on a two-enzyme platinum microelectrode system

Abstract

An electroenzymatic method based on two coupled enzymatic activities (glycerokinase and glycerol-3-phosphate oxidase) was developed using a platinum microelectrode for the determination of free glycerol in biodiesel samples. The electroenzymatic method proposed showed a good linear correlation coefficient (R = 0.9894), with a linear response in the concentration range of 8.2 9 10 -5 to 5.7 9 10 -4 % (w/w) and a limit of detection of 6.0 9 10 -5 % (w/w). The results obtained for the free glycerol content of select biodiesel samples were compared with their gas chromatography (GC) analyses. The relative errors for glycerol determination using this enzymaticamperometric method were in the range of -8.0 to 3.0%. The proposed method was shown to be promising for the analysis of glycerol in biodiesel samples and a simple and inexpensive method in comparison to gas chromatography.

Determinação de glicerol livre e total em amostras de biodiesel por método enzimático com detecção colorimétrica

“…Neste trabalho, o método de transesterificação e de extração do glicerol livre seguiu o mesmo procedimento desenvolvido em trabalhos anteriores. 2,17 O método enzimático com detecção colorimétrica utilizado em todas as análises baseou-se na dosagem do substrato pelo método de ponto final. A análise colorimétrica foi realizada em 505 nm, sendo que um volume de 30 mL (para GL) ou 10 mL (para GT) do extrato aquoso e 1 mL do kit enzimático foram adicionados à cubeta de análise.…”

“…Observa-se nesta tabela bons resultados de recuperação, variando de 105 a 108%, sendo possível concluir que o procedimento de extração do glicerol livre proposto em trabalhos anteriores pode ser utilizado como método padrão na quantificação de glicerol livre em amostras de biodiesel. 2,17 A Tabela 4 apresenta os valores médios obtidos de glicerol total junto com o desvio padrão das amostras, assim como os valores obtidos por CG, a recuperação do método e o erro relativo da amostra.…”

“…15 Este tipo de análise também foi realizado para determinação de triglicerídeo, utilizando-se um biossensor amperométrico construído a partir de uma membrana de acetato de celulose na qual foram imobilizadas três enzimas: uma lipase comercial, a GK e a GPO, sobre o eletrodo de trabalho de platina e, também, para análise de glicerol livre e total em amostras de biodiesel. 16,17 Este trabalho teve como objetivo desenvolver um método analítico de baixo custo, sensível, rápido e com instrumentação simples para a determinação do teor de GL e GT em amostras de biodiesel. Para isso, foi utilizado um kit enzimático comercial para determinação de triglicerídeos com detecção colorimétrica.…”

Biodiesel: Contaminants and Quality Control

“…46 Métodos alternativos não cromatográficos também são citados na literatura. [48][49][50][51][52][53] Esses métodos envolvem determinações espectrofotométricas, espectrofluorimétricas e eletroanalíticas. Determinações baseadas na oxidação do glicerol pelo periodato, com posterior reação do formaldeído formado na reação com a acetilacetona, produzindo 3,5-diacetil-1,4-di-hidrolutidina são apresentadas na literatura.…”

“…52 Em outro procedimento, estratégia parecida foi utilizada para determinação de glicerol livre empregando um microeletrodo de platina. 53…”