ABSTRACT. Brewer's spent grain (BSG) was characterized by physicochemical, total phenolic compound and flavonoids contents. Antioxidant activity was evaluated by four different assays. The chromatographic analyses were used to quantify the phenolic compounds and the fatty acids in BSG. Ethanolic extracts were tested to evaluate antibacterial activity. The higher concentration of total phenolic compounds for BSG was obtained in the extraction with ethanol 20%. BSG showed an antioxidant potential for all tests evaluated. In the case of chromatographic analysis, phenolic acids and flavonoids, such as syringic acid and catechin, respectively, were detected in high quantities. Regarding to the fatty acids profile, polyunsaturated fatty acids, such as linoleic and oleic acids, were found in significant amounts. No antibacterial activity was reported for bacterial cultures and concentrations tested. BSG may be considered a protein source, rich in fiber, polyunsaturated fatty acids and bioactive compounds with antioxidant potential.Keywords: by-products, brewer's spent grain, flavonoids, antioxidant.Compostos bioativos do bagaço de malte: compostos fenólicos, ácidos graxos e capacidade antioxidante in vitro RESUMO. Bagaço de malte (BM) foi caracterizado pela avaliação do conteúdo total de compostos fenólicos e flavonóides e propriedades físico-químicas. A atividade antioxidante foi avaliada por quatro diferentes ensaios. Análises cromatográficas foram utilizadas para quantificar os compostos fenólicos e os ácidos graxos do BM. O extrato etanólico foi testado para avaliar a atividade antibacteriana. A concentração mais elevada de compostos fenólicos totais para o BM foi obtida na extração com etanol a 20%. O BM mostrou um potencial antioxidante para todos os testes avaliados. Na análise cromatografia líquida, ácidos fenólicos e flavonóides, tais como o ácido siringico e catequina, respectivamente, foram detectados em quantidades elevadas. Em relação ao perfil de ácidos graxos, ácidos graxos poli-insaturados, como ácidos oleico e linoleico, foram encontradas em quantidades significativas. Nenhuma atividade antibacteriana foi observada para culturas de bactérias e concentrações testadas. BM pode ser considerado como uma fonte de proteína, rico em fibra, ácidos graxos poli-insaturados e compostos bioativos com potencial antioxidante.Palavras-chave: sub-produto, bagaço de malte, flavonoides, antioxidante.