Objetivo: investigar o perfil sociodemográfico, gineco-obstétrico e o envolvimento com substâncias psicoativas por gestantes atendidas em um ambulatório no Sul do Brasil. Método: pesquisa transversal, com amostra de 431 gestantes. A coleta de dados ocorreu no período de agosto de 2018 a julho de 2019, por meio do instrumento padronizado Alcohol, Smoking and Substance Involvement Screening Test e um questionário sociodemográfico e gineco-obstétrico. Na análise de dados foi empregado o teste qui-quadrado. Resultados: a prevalência de uso de substâncias psicoativas entre as gestantes foi de 28,7%, com destaque para o álcool e tabaco. O derivado do tabaco constitui a substância com maior frequência de uso diário (12,3%); que desencadeia maior desejo/urgência de consumo diariamente (11,4%); maior taxa de tentativas de controle nos últimos três meses (9,0%). Conclusão:o uso de substâncias psicoativas suscita o desenvolvimento de ações educativas que estimulem a conscientização sobre suas consequências na gestação, assim como a captação precoce das gestantes para construção de estratégias de redução e/ou abstinência.