Cinética de espermatozoides criopreservados de bovinos após sexagem por citometria de fluxo

Abstract

Resumo -O objetivo deste estudo foi comparar a cinética de sêmen bovino criopreservado não sexado, sexado X e sexado Y antes e depois da seleção espermática por gradiente de Percoll. Amostras criopreservadas de sêmen não sexado (grupo NS) e sexado X (grupo SX) e Y (grupo SY) por citometria de fl uxo, de quatro touros, foram avaliadas quanto à motilidade e à cinética espermática com o "computer-assisted semen analysis" (CASA) e o restante da amostra de cada grupo foi submetido à seleção espermática em gradiente de Percoll (45:60%). Após a seleção, foram realizadas as mesmas avaliações que antes da passagem pelo Percoll. A motilidade do grupo NS foi superior à dos grupos SX e SY e não foi observada diferença entre os grupos SX e SY nos parâmetros de cinética espermática obtidos pelo CASA, antes ou após a passagem pelo Percoll. Foi observado aumento na motilidade para todos os grupos como efeito da seleção pelo Percoll. O processo de sexagem por citometria de fl uxo afeta a cinética espermática, e a passagem pelo Percoll aumenta a motilidade do sêmen sexado e não sexado sem alterar a cinética do sêmen não sexado.Termos para indexação: gradiente de Percoll, motilidade espermática, sêmen sexado. Kinetics of bovine cryopreserved sperm cells after sexing by fl ow cytometryAbstract -The objective of this study was to compare the kinetics of bovine cryopreserved nonsexed, sexed for X and sexed for Y sperm cells before and after selection using Percoll gradient. Cryopreserved nonsexed (NS group) semen samples and sexed for X (SX group) and for Y (SY group) by fl ow cytometry, from four different sires, were analyzed for motility by computer-assisted semen analysis (CASA), and the remainder of the sperm samples for each group was submitted to Percoll (45:60%) gradient selection. After Percoll selection, the same sperm analyses done before the passing through Percoll gradient were performed. Sperm motility was higher in the NS group than in the SX and SY groups, and no differences were observed between these last two groups for any of the sperm parameters evaluated by CASA, either before or after Percoll selection. Percoll increased motility for all groups. Changes in other characteristics evaluated by CASA were observed only in the NS group. Sex-sorting procedure by fl ow cytometry affected sperm kinetics, and Percoll gradient selection increases motility in sexed and nonsexed sperm without affecting the kinetics of nonsexed sperm.

Impacto da ultrassonografia doppler no exame clínico andrológico de reprodutores equinos

“…É importante ressaltar que na análise subjetiva, o nível de correlação pode sofrer u variação entre 0,15 e 0,83 (Januskauskas et al, 2003) e a estimativa pela análise computadorizada, entre 0,82 e 0,98 (Farrell et al, 1996). Segundo Carvalho et al (2009), durante a avaliação subjetiva, há uma tendência em superestimar a percentagem de espermatozoides móveis, especialmente em amostras com alta concentração espermática. Esta superestimação, entretanto, não é comum para a espécie equina que apresenta ejaculado com maior proporção de plasma seminal em relação aos espermatozoides.…”

Motility characterization of albumin sexed spermatozoa in two different diluents and additional antioxidant

“…While spermatozoa Y with a small head size allows more movement to be able to penetrate albumin (lower layer). Nevertheless, the study of Carvalho et al (2009) and Penfold et al (1998) stated that there were no differences between spermatozoa X and Y, except for swimming patterns (linearity and straightness). Many methods can be used for sperm sexing, which were gradient percoll, gradient albumin, flow cytometry, electrophoresis etc (Susilawati, 2014).…”

Estudo sobre as diferentes técnicas de sexagem de espermatozoides

“…Para isso algumas tecnologias têm sido testadas nessa área incluindo a utilização de anticorpos específicos do gênero, centrifugação em gradiente de densidade, e citometria de fluxo (18). Estas técnicas ainda se encontram em processo de aperfeiçoamento para se adequarem à indústria do sêmen, uma vez que todas causam danos aos espermatozoides, ao seu DNA, a motilidade, assim como a cinética espermática comprometendo o processo de fertilização (2,19).…”