Comportamiento del Semen Bovino Sexado Congelado-Descongelado en Fertilización in vitro (FIV) Capacitado Mediante BO en dos Concentraciones versus Percoll

Abstract

Morphol., 35(4):1337Morphol., 35(4): -1341Morphol., 35(4): , 2017. RESUMEN:El objetivo fue comparar la tasa de división (TD) y desarrollo embrionario (DE) con semen sexado X (SX) en FIV capacitado con Percoll vs. BO, y evaluar el efecto de dos concentraciones (5x10 6 vs. 10x10 6 espermatozoides/ml), capacitado con BO, comparado con el semen no-sexado (NS). Un avance importante es predeterminar el sexo en bovinos, es posible obtener mayor proporción de terneras a partir del citómetro de flujo con la capacidad de seleccionar los espermatozoides X por la diferencia del ADN (4 %, bovinos), con confiabilidad del 90 %. El SX aumenta la eficiencia reproductiva, permite la selección de hembras e incrementa la ganancia genética. Se obtuvieron complejos ovocito cúmulus (COC), de ovarios de matadero, se cultivaron para maduración en gotas de 100 µl de TCM-199 + 5 % de suero fetal bovino + 0.005 U/ml de (FSH-p) + 10 IU hCG/ml + 1µg Estradiol (E2)/ml, 15 COC/gota, cubiertas con aceite mineral, en incubadora (38,5 ºC, 5 % de CO 2 y 95 % de humedad), 22 h. Posmaduración se dividieron en 4 grupos (G1, G2, G3, G4) y se realizaron dos experimentos simultáneamente: I) G1: NS a 5x10 6 , G2: SX a 5x10 6 , G3: SX a 10x10 6 espermatozoides/ml capacitados con BO. II) G2: SX a 4,5x106 espermatozoides/ml capacitados con BO y G4: SX capacitado con Percoll a 5x10 6 espermatozoides/ ml. Se colocaron 15 COC/gota de semen cubiertas con aceite mineral, en incubadora, 18 h. Para el desarrollo se colocaron en gotas de CR1aa, en incubadora. Se aplicó el test de χ 2 . La TD a las 48 h entre G1 y G3 no presentó diferencias significativas (p<0,05), sin embargo, en ambos grupos fue significativamente mayor al G2. En el DE al día 7 hubo diferencias significativas (p<0,05) a favor del G4. Se obtuvo mayor DE con el SX capacitado con Percoll respecto al BO y no hubo diferencias entre ambas concentraciones de semen.PALABRAS CLAVE: Semen sexado; Fertilización in vitro; Bovinos; Embriones. INTRODUCCIÓNEn vaquillonas lecheras el rango de preñez por inseminación artificial (IA) es del 67 % aproximadamente, siendo la relación entre los sexos machos y hembras 50/50. Es de gran importancia lograr predeterminar el sexo de las crías ya que en la cría para leche son de valor las hembras y muy poco valor los machos. Se hicieron muchos intentos en este sentido que no fueron aplicables. La obtención de mayor número de terneras en proporción significativa respecto a los machos se hizo posible a partir de la creación del citómetro de flujo con capacidad de seleccionar los espermatozoides X e Y por la diferencia del ADN (aproximadamente 4 % en bovinos), con una confiabilidad del 90 % (Xu et al., 2009). Es el único método validado para la selección del sexo precoz actualmente (de Graaf et al., 2009).Esta tecnología solo se ha desarrollado en el uso comercial en la especie bovina. El uso de semen sexado aumenta la eficiencia reproductiva, permite la selección de hembras superiores para reposición, posibilitando un incremento de la ganancia genética (Weigel, 2004;Mocé et a...

Efecto de dos medios de capacitación espermática (B.O vs Percoll) en la fecundación in vitro de ovocitos bovinos

“…En el análisis previo del material utilizado con el tratamiento de densidad inicial promedio de pajuelas SX, se obtuvieron resultados similares a los de la investigación llevada a cabo por Filipiak et al (2017), donde se logró un promedio del 65% y una puntuación de vigor de 3,50 en una escala de 0 a 5. Mientras que, en comparación con el trabajo de Mutmainna et al (2021), quienes obtuvieron motilidad y vigor tras 2 horas de la capacitación con 50% y 3, respectivamente, siendo la motilidad de esta investigación superior.…”

“…Además, los datos obtenidos en cuanto al clivaje del T3 son similares a los reportados por Demyda et al (2015). Sin embargo, al comparar los resultados obtenidos mediante el desarrollo embrionario con los reportados por Filipiak et al (2017), se observa que ellos obtuvieron mejores resultados con un promedio del 65% y una puntuación de vigor de 3,50 (en una escala de 0 a 5) para semen sexado y un promedio de 60% y una puntuación de vigor de Presumiblemente, la discrepancia entre los estudios podría deberse a variaciones en los sistemas de producción in vitro, por lo que aún se requeriría una mayor investigación utilizando diversas condiciones de cultivo (Magata et al 2021). La fertilización es un proceso complejo y difícil de simular en condiciones in vitro, incluso en la FIV, los espermatozoides no están expuestos a los mismos desafíos para alcanzar un ovocito que en el tracto reproductivo femenino después de la inseminación.…”

“…La utilización del sistema de sexaje (SS) junto con otras biotecnológicas reproductivas maximiza sus ventajas y, al mismo tiempo, contribuye a reducir sus costos al lograr el "producto" deseado (ya sea hembras o machos), lo que en consecuencia puede dar como resultado un incremento de la mejora genética en el sector lácteo (Filipiak et al 2017, Maicas et al 2020.…”

Resveratrol Reduces ROS by Increasing GSH in Vitrified Sheep Embryos

“…The COC showing expanded CC were washed in 50 µL of BO-IVF™ in vitro fertilization (IVF) medium (IVF Bioscience, Cornwall, United Kingdom), covered with mineral oil, and tempered at 38.5 • C. Then, 30 oocytes were distributed in four-cell culture dishes in 100 µL of the IVF medium [13]. Straws with semen from fertile rams were thawed at 37 • C before use.…”