Criopreservação do sêmen ovino em meio diluente à base de água de coco em pó (ACP-102c)

Abstract

RESUMOO objetivo deste trabalho foi avaliar o diluente ACP-102c na criopreservação do sêmen ovino em comparação com o diluidor tris-glicose-gema (TRIS) e o sêmen fresco. Foram coletados 48 ejaculados de quatro ovinos, sendo tomadas duas alíquotas por ejaculado para diluição e criopreservação em ACP-102c ou TRIS e uma terceira alíquota utilizada para análise do sêmen fresco. O sêmen fresco e o criopreservado em ambos os diluidores foram avaliados para viabilidade, integridade de membrana plasmática e acrossomal, teste hiposmótico, fragmentação do DNA e de motilidade espermática. Após descongelamento, ambos os diluidores não diferiram para viabilidade espermática, integridade de membrana plasmática e acrossomal, fragmentação de DNA e nas variáveis quantitativas e qualitativas de velocidade espermática, mas diferiram no teste hiposmótico, motilidade total e progressiva e amplitude lateral da cabeça, bem como em todas as variáveis de motilidade avaliadas, exceto linearidade e progressividade, após duas horas de incubação à 37 o C. Houve variabilidade entre reprodutores na motilidade total e progressiva do sêmen criopreservado em ACP-102c após descongelamento. O diluidor ACP-102c conferiu menor proteção aos espermatozoides ovinos contra danos do congelamento quando comparado ao TRIS, mas o aprimoramento de sua formulação e protocolos mais adequados de congelação poderão torná-lo uma alternativa na congelação do sêmen ovino.PALAVRAS-CHAVE: ACP-102c; criopreservação; sêmen ovino. CRYOPRESERVATION OF RAM SEMEN IN POWDERED COCONUT WATER (ACP-102c) BASED EXTENDER ABSTRACTThe aim of this study was to evaluate the ACP-102c extender in the cryopreservation of ram semen compared to tris-glucose-egg yolk (TRIS) extender and fresh semen. Forty-eight ejaculates were collected from four rams and two aliquots per ejaculate were taken for dilution and cryopreservation in ACP-102c or TRIS and a third aliquot used for the fresh semen analysis. Either the fresh semen and cryopreserved in both extenders were evaluated for viability, integrity of plasma and acrosomal membrane, hypoosmotic swelling test, DNA fragmentation and sperm motility. The extenders did not differ for sperm viability, acrosome and plasma membrane integrity, DNA fragmentation and quantitative and qualitative parameters of sperm velocity after thawing, but differed in hypoosmotic swelling test, total and progressive motility and lateral extent of the head as well as in all motility parameters evaluated (except linearity and straightness) after two hours of incubation at 37 o C. There was variability among rams in total and progressive motility of semen cryopreserved in ACP-102c after thawing. The

Influence of Coconut Powder Water-Based Conservation Medium (APC-102c) for Maintaining Mitochondrial Activity of Cryopreserved Ram Sperm

“…A viabilidade espermática avaliada pelo teste utilizando eosina-nigrosina (EN) foi afetada pela criopreservação em ambos os tratamentos; no entanto, não houve diferença estatística significativa entre TRIS e ACP-102c pós-descongelação, o que corrobora com resultados observados na literatura, quando comparado sêmen ovino criopreservado nos diluentes TRIS e ACP-102c [3]. A integridade da membrana espermática é um atributo essencial para a fertilização, e a criopreservação é capaz de afetar a membrana plasmática, bem como a região flagelar [14], como foi constatado nesse estudo.…”

Coconut water-based extender for seminal preservation in small ruminants: A meta-analysis study

“…In addition to having water, sugars, proteins, salts, and vitamins in its composition, coconut water is easy to prepare and has a low cost (Carvalho et al, 2006;Rondon et al, 2008). Moreover, improvements in sperm cells integrity and viability in small ruminants have already been reported with the use coconut water (Cavalcante et al, 2014;Daramola et al, 2016;Brito et al, 2019).…”

“…The use of coconut water-based extenders is a viable alternative in the seminal cryopreservation of several animals, such as goats (Daramola et al, 2016), dogs (Cardoso et al, 2003;Cardoso et al, 2005), angola (Numida meleagris) (Rondon et al, 2008), capuchin monkeys (De Araújo et al, 2009), fishes (Viveiros et al, 2010) and pigs (Toniolli et al, 2010). Furthermore, more recent works have shown favorable results for the use of coconut water in characteristics such as viability, acrosome and sperm DNA integrity (Cavalcante et al, 2014), motility, mitochondrial activity, and sperm membrane integrity (Daramola et al, 2014;Brito et al, 2019), indicating that coconut water has the potential to be used in seminal cryopreservation in small ruminants.…”

Testicular thermography and seminal quality in bucks submitted to intermittent scrotal insulation in a tropical climate

“…Immediately after collection, sperm kinetics were assessed by computer analysis (CASA) using the Sperm Class Analyzer program (Microptic S. L, Barcelona, Spain), according to the methodology employed by Cavalcante et al (2014b). Therefore, a 10 µL sample of fresh semen from each ejaculate was diluted in 1 mL (1:100) of a solution containing coconut water powder (ACP), prepared in ultrapurified water, according to the manufacturer's recommendations (ACP Biotecnologia, Fortaleza, Brazil).…”

“…Since reproduction depends on the quality of the ejaculation, periodic seminal evaluations must be performed in domestic ruminants to select and monitor male species . Semen collection is usually performed using an artificial vagina or electroejaculation (Colégio Brasileiro de Reprodução Animal [CBRA], 2013), and the evaluation can be performed by direct optical microscopy or modern methods such as computerized analysis (Cavalcante, Brasil, Salgueiro, Salmito-Vanderley, & Nunes, 2014b).…”