Cromatografia Líquida Capilar1. Principais Características da Técnica

Abstract

Este trabalho de revisão crítica é parte de uma série cujo principal objetivo é apresentar e discutir as características mais relevantes da cromatografia líquida capilar (cLC). Dentre os vários aspectos cobertos neste trabalho, a revisão inclui o desenvolvimento, diferentes nomenclaturas propostas para a técnica, as principais vantagens, quando comparadas com a contrapartida denominada Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC), e a instrumentação necessária para a operação no modo cLC. São também apresentadas e discutidas as principais razões pelas quais a cLC não é ainda uma técnica analítica de rotina.

Desenvolvimento de colunas miniaturizadas do tipo PLOT para cromatografia líquida de alta eficiência

“…Por isso, alguns pesquisadores fizeram experimentos com colunas tubulares abertas com diâmetros internos maiores, 25-50 µm, e empregavam temperaturas elevadas a fim de diminuir a viscosidade da fase móvel para, consequentemente, aumentar a difusão dos analitos. [30][31] [32] Atualmente, devido aos avanços tecnológicos, problemas como dispositivos de injeção inadequados, altas pressões, bombas incapazes de bombear pequenos fluxos, dificuldade de acoplamento com detectores mais sensíveis, conexões com grandes volumes mortos já foram parcialmente minimizados. Sendo assim, tornou-se mais fácil e possível explorar a utilização das colunas tubulares abertas em LC miniaturizada.…”

Preparação e avaliação de colunas capilares monolíticas à base de sílica modificadas com polidimetilsiloxano (PDMS) para uso em cromatografia líquida capilar

“…Com o desenvolvimento da HPLC -que emprega colunas de 3,2 a 4,6 mm de diâmetro interno (d.i. ), recheadas com partículas da ordem de 3 a 5 µm de diâmetro Dentro deste contexto, desenvolveu-se a cromatografia líquida de ultra alta eficiência, do inglês Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC) -que emprega colunas de 1 a 2,1 mm de d.i., recheadas com partículas de até 2 µm de diâmetro [6]; e a cromatografia líquida capilar (CLC) -que emprega colunas de 150 a 500 µm de d.i., segundo nomenclatura proposta por Chervet et al [7] (tabela 1), e que podem ser recheadas com diferentes tipos de fases estacionárias [5,8]. Porém, a instrumentação utilizada nesta técnica (conexões, bomba, cela do detector) deve ser totalmente redimensionada para volumes menores, da ordem de nanolitros [5].…”

“…Porém, a instrumentação utilizada nesta técnica (conexões, bomba, cela do detector) deve ser totalmente redimensionada para volumes menores, da ordem de nanolitros [5]. Algumas das maiores barreiras no desenvolvimento da CLC são: a menor disponibilidade de equipamentos comerciais [8], além da limitação de colunas comerciais disponíveis [9] (em comparação com HPLC).…”

“…das tubulações deve ser extremamente baixo. As conexões empregadas para ligar as tubulações e a coluna também são importantes, e hoje em dia já existem conexões com zero volume morto [8].…”

“…(a) Colunas tubulares abertas: São constituídas de um tubo de sílica fundida com uma camada fina de FE recobrindo sua parede interna. Esse é o mesmo tipo de coluna utilizada em cromatografia gasosa [8]. Em teoria, elas podem apresentar eficiências maiores que as colunas particuladas, porém, seu diâmetro deveria ser menor que 5 µm [5].…”