Cryopreservation of Prochilodus lineatus semen: effect of cryoprotectants combination

Abstract

The study was conducted with the objective of comparing the toxicity and the effect of the combination of intra and extracellular cryoprotectants in curimba Prochilodus lineatus sperm cells subjected to cryopreservation. Semen from 19 males were analyzed and diluted in four solutions comprise of intra and extracellular cryoprotectants in the following combinations: methanol+lactose, methanol+egg yolk, DMSO+lactose and DMSO+egg yolk. A portion of the diluted semen was frozen while the remaining fraction was kept in repose and evaluated after 10 min. For freezing, the diluted samples were packaged in 0.50 mL straws and placed into liquid nitrogen vapor for 24 h and, after this time, submerged into liquid nitrogen for 10 days. The combination of DMSO+lactose was less toxic to the diluted semen, resulting in higher motility rates and durations when compared to the other treatments. After thawing, the highest motility rate and duration were obtained using lactose as extracellular cryoprotectant, regardless of its combination. There was no significant difference between treatments when analyzing sperm morphology after thawing. Considering the effects of the tested treatments, the use of lactose as an extracellular cryoprotectant added with DMSO or methanol is the most suitable, since these combinations presented the highest motility rates and durations and low morphological change rate after thawing.Keywords: genetic preservation; cryobiology; sperm analysis; freezing protocol; toxicity; curimba CRIOPRESERVAÇÃO DO SÊMEN DO Prochilodus lineatus: EFEITO DA COMBINAÇÃO DE CRIOPROTETORES RESUMOO estudo foi realizado com o objetivo de comparar a toxicidade e o efeito da combinação de crioprotetoresintra e extracelulares em espermatozóides de curimba Prochilodus lineatus submetidos à criopreservação. O sêmen de 19 machos foi analisado e diluído em quatro soluções com crioprotetores intra e extracelulares nas seguintes combinações: metanol+lactose, metanol+gema de ovo, DMSO+lactose e DMSO+gema de ovo. Uma porção do sêmen diluído foi congelada enquanto que a fração remanescente foi mantida em repouso e avaliada após 10 min. Para o congelamento, as amostras diluídas foram envasadas em palhetas de 0,50 mL e colocadas em vapor de nitrogênio líquido durante 24 h e, após este tempo, submersas em nitrogênio líquido durante 10 dias. A combinação de DMSO+lactose se mostrou menos tóxica para o sêmen diluído, resultando em taxas mais elevadas de motilidade e duração espermática quando comparadas com os outros tratamentos. Após descongelamento, as maiores taxas de motilidade e duração foram obtidas usando lactose como crioprotector extracelular, independentemente da sua combinação. Não houve diferença significativa entre os tratamentos ao analisar a morfologia espermática após a descongemento. Considerando-se os efeitos dos tratamentos utilizados, o uso de lactose como crioprotector extracelular, adicionada ao DMSO ou metanol, é o mais adequado, uma vez que estas combinações apresentaram maiores taxas de motilidade e duração espe...

Effects of cooling rates on the quality of Prochilodus lineatus (Valenciennes, 1836) sperm

“…However, none of the treatments exceeded 50% of sperm morphological alterations. Vasconcelos et al () did not verify significant differences between major and minor morphological changes when evaluating the effects of different cryoprotectors on P. lineatus semen freezing using the standard method (“dry‐shipper + nitrogen cylinder”). However, these authors did not evaluate freezing curves and used dry‐shipper (uncontrolled cooling rate) as a cryopreservation method.…”

Estudo Do Potencial Crioprotetor De Extrato De Algaroba (Prosopis Juliflora) Na Refrigeração De Espermatozoides Epididimários Bovino

“…Alguns estudos demonstraram que a presença de carboidratos (sacarose, lactose e frutose), em diluidores foram benéficos para criopreservação de sêmen de peixes (VASCONCELOS et al, 2018), bovino (FARIAS et al, 2019) e equinos (HEMPEL, 2019). Nosso estudo acredita que o Ca 2+ pode ter uma participação indireta com o processo de motilidade espermática, uma vez que não conseguimos descrever o mecanismo de ação desse elemento, nas condições deste estudo.…”